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二、关于胚胎干细胞、iPS细胞特性会议发言：
* n6 d3 ~! W# t1.周 琪，中科院动物所研究员
R, A" j4 L) e" s2 U9 l3 N题目：iPS细胞发育潜能及安全性评价" h C' L5 E3 W. I
（1）开场白继续回忆几年前听干细胞报告人如何少，现在的听众如何多（听过周琪多次报告，几乎每次都提到此事）。提到973首席今天基本都参会。
4 R# f7 a; T- s6 |（2）发育潜能的评价指标：核型的检测，体外传代能力、体外分化能力，体内传代能力，形成嵌合体能力，四倍体补偿能力等。通过四倍体补偿回答了iPS多潜能性问题。0 A2 Q G7 Y6 O3 J$ |
(3)对iPS致瘤性的研究几乎都是来自于嵌合体。继续回忆“小小”鼠的工作。' `. U7 n2 W, b/ U
（4）IPS来源的动物发现肿瘤的发生，而这些肿瘤都可以检测到外因子的表达。这些外因子的插入可能是肿瘤发生的元凶。9 g: H* v$ x% X9 y3 y" u
（5）检测几种不同方法得到的ipS，如C-Myc free，Oct4单一诱导的IPS，研究发育的比较。是什么决定这些不同来源细胞的发育功能目前不清楚。
1 d2 W- A+ j' `! f. E' ^ T（6）向神经干细胞转分化的工作，评价其安全性。1 r0 I5 K. B( I5 y4 q9 a1 }/ n
（7）介绍去年发表在JBC关于miRNA的工作。2 `2 O O, k7 G$ |8 y
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2.裴端卿，中科院广州生物医药与健康研究院研究员
. D4 A- O: Q7 b2 x$ u" B* ]题目： Reprogramming: A look at Vitamin C/ f2 K ^( W9 P0 F! r
（1）回忆过去10年所做的工作，研究Oct4调控ESC的网络，转录因子间作用等。非选择性iPS诱导系统。
# x6 b: X) P# X- K! T0 K（2）与张毅等实验室合作，发现维生素C通过组蛋白修饰增加体细胞重编程，通过减少H3K36me2/3水平影响重编程。文章近期将发表在Cell Stem Cell。7 B) }3 L# [# }; O/ p
（3）维生素C通过影响Jhdm1a/1b基因发挥其作用。
: K) e9 P; z7 a. \（4）用单因子Oct4可使细胞重编程，3个实验室：丁盛、邓宏魁和裴端卿同时发现这个现象。但效率很低，改变H3K36me2/3后可增强单因子Oct4重编程的效率。( C. g" d; E5 }, T" u0 Y, f# W' i
: R6 r) I4 U( J9 a3.高绍荣，北京生命科学研究所研究员0 g/ j& N/ w& h- T# k7 C: J3 h
题目：IPS：Molecular Mechanism and potential application/ u; y" ?# N$ }8 c' R# Y# n
（1）理解IPS多能性和机制方面的工作。介绍四倍体补偿实验。使用的是inducable vector进行iPS制备。使用小鼠脂肪细胞进行reprogramming，获得的iPS进行四倍体补偿实验。四倍体补偿获得的小鼠的脂肪细胞（或者血细胞）再制备iPS，然后再进行四倍体补偿，连续进行了6代，以证明iPS的全能性。
0 k, d0 k$ ]- X& a(2)使用RNASeq、miRNA-Seq、ChIP-Seq H3K27、DNA methylation-Seq等方法，分析不同代次、不同来源的iPS，以研究其DNA甲基化等表型的差异性。
3 r: K+ e6 m5 t) c# A6 S o(3) 介绍用iPS治疗疾病方面的工作。以beta地中海贫血（阴性遗传单基因疾病）为疾病模型。
! M! U+ W0 H% @+ [(4)使用同源重组方法更正iPS细胞的突变基因。比较更正前后基因表达谱的差异。分化iPS向造血细胞分化。证明基因打靶可以修复某些遗传病。
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7 u* G t1 p- J3 L' q4.邓宏魁，北京大学生命科学院教授) ~9 M8 A: |! l5 A: O- t
题目：建立多潜能干细胞以及向胰岛分泌细胞的定向诱导分化3 E7 u) I/ e& a# P% L" Z& i" N' G* w9 l& }
（1）建立iPS时，使用CMV启动子drive EGFP，若局部区域无GFP表达，提示该部位细胞发生重编程，因为CMV在ESC中沉默，不能驱动GFP表达。. L! Z$ m1 \$ s, ~2 u$ w6 K
（2）建立一个新的人iPS基因组合：Oct4、Sox2、Klf4、UTF1，后者是新的重编程因子。发现P53是体细胞重编程的主要障碍。
' p8 ]3 \5 L" ?/ ] X（3）小分子化合物筛选导致重编程的分子，包括组蛋白去甲基化抑制剂、组蛋白乙酰化抑制剂等。同时抑制重编程的主要障碍因素能增加重编程效率。6 q8 v/ B5 X( y' I
（4）建立单基因Oct4诱导重编程体系（Tet-On Oct4）。建立新的vector free和高效的重编程体系。
1 F$ |' @- c2 V) u% E6 x" m0 m# Z2 g（5）诱导ES向胰岛细胞定向分化。建立大动物猴子iPS和疾病模型，进行糖尿病大动物实验。: e+ m# G# Z+ N/ ~- }
0 y3 ^1 n" ?* D `5.金 颖，中科院上海生科院/上海交通大学医学院健康科学研究所研究员 ' Y& P/ Z& I2 `9 c, k/ W9 K
题目：转录因子Oct4蛋白质泛素化修饰与多能干细胞分化和体细胞去分化。, D" o/ h n) U1 ^) H# n: V+ r
（1）过去10年一直研究与Oct4相互作用的蛋白质和它所调节的靶基因。Wwp2蛋白泛素化酶，能泛素化Oct4，也抑制Oct4转录调控（2004年发表在JBC）。 A0 q W, i7 R! z, |
（2）Oct4也被SUMO-1修饰。! O5 ?3 G$ V- V$ H5 u
（3）研究Oct4被泛素化修饰后的作用和结果。0 O: b: I2 K e9 u
（注：金颖老师此次终于没再继续讲“如何建立人的ES细胞系”。）
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6.肖 磊，浙江大学动物科技学院教授' F3 | R+ w! Y4 l
题目：ES/iPS细胞和转基因动物研究! N! E3 P5 I. z. U9 L! E
（1）建立猪iPS和利用猪iPS建立转基因动物模型。
' o9 U2 D9 x0 C4 K$ o（2）介绍小鼠Knock-out过程。因某些动物无ES细胞，无无法进行基因打靶工作。介绍建立大鼠iPS工作（已发表在Cell Stemcell）。
5 r1 D; v( T. G. D7 g（3）使用可诱导性vector建立猪iPS，并进行鉴定。使用猪iPS制备嵌合体猪需时间较长，故使用核移植方法建立。
$ d% v+ M! ^' {2 \7 J4 d, y（4）全国多个实验室建立“猪的联盟”，共同研究猪。已获得嵌合体猪。& ~) f. T/ V2 o5 C/ k! T
) g$ q" d9 w8 [$ [7.卢光琇 湖南医科大学人类干细胞国家工程中心题目：各种遗传性疾病的干细胞建库向血小板诱导分化1 P" [/ a$ ~: z6 j1 _3 H1 Y
（1）已建立285个人ESC细胞系，是世界上最大ESC提供种子细胞库。每年进行试管婴儿1.3万，今年进行了1.8万。
* h; ]8 H! C$ q: b r8 x7 N（2）与骨髓库相匹配，有600个ESC可满足湖南7000万人口需要。, H' b2 _8 {# |8 ^+ `; }6 b
（3）使用iPS细胞进行遗传病研究，重点是血小板无力症。9 \; D6 e! u3 E) w9 c
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发表于 2011-11-15 10:02
发表于 2011-11-15 11:23
