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楼主: eileenyangliu
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[讨论] 悬浮培养出来的干细胞团怎么传代?   [复制链接]

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发表于 2011-11-28 18:46 |只看该作者
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回复 eileenyangliu 的帖子+ J8 @5 b3 `6 [+ W3 f! j7 I+ M

' D) ^* V4 J# }你是培养皮肤什么部位的干细胞?组织块培养的话细胞能迁移出来吗?这个我倒是没有试过。
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发表于 2011-11-28 21:26 |只看该作者
回复 eileenyangliu 的帖子) Z( F! Z0 `% I3 X  Y

8 l) s  b+ E4 ?7 J$ M! k8 m今天上午找你没找着,我就自己去了。酶在什么地方你都知道,自己去拿就行。大管0.1% 3mL,小管0.5% 1mL。

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发表于 2011-11-28 21:49 |只看该作者
回复 bin 的帖子& n0 Q2 r0 x: U( N
, M1 Q$ {) N; i+ c0 |! r
我养的成年山羊背部,和七八个月的胎羊背部皮肤,成纤维可以长出来,但是时间比较长,然后从成纤维细胞中培养干细胞,那你是怎么养的皮肤干细胞???
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发表于 2011-11-29 15:54 |只看该作者
有些干细胞还真的可以用胰酶消化,跟干细胞属性有关吧,做得时候的查自己所养细胞的特性,很重要啊
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发表于 2011-11-29 22:41 |只看该作者
回复 phdyhm 的帖子
6 G: w/ i5 k- q* O7 K4 V% m- J5 V6 x
" W  i2 F6 T9 q. y请看清题,人家说的是悬浮培养形成的干细胞球,不是悬浮培养细胞系,所以:1靠吹是不能把细胞吹成单细胞的,2细胞培养不能加血清,3传不传代是由球的大小决定的。. k' {0 t4 b8 C0 ?
以下是回复楼主的意见:用Accutase酶传代,具体上网去查
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发表于 2011-11-30 09:48 |只看该作者
悬浮细胞团是不用胰酶的吧...我养的永生化细胞就直接吹散再加一倍的培养基...
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发表于 2011-11-30 10:36 |只看该作者
悬浮培养的干细胞不能用胰酶消化传代,建议用枪轻轻吹打即可
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发表于 2011-11-30 11:15 |只看该作者
只做过神经干细胞的悬浮培养,对于生长状态好的神经球直接机械轻柔吹打就可以获得单细胞悬液,吸取重新接种就可以了;对于有些老的神经球可以结合酶消化和机械吹打也是可以的
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发表于 2011-11-30 16:46 |只看该作者
我觉得用胶原酶可以把细胞团分离开,胰酶一般用来消化贴壁的细胞,消化细胞团的话对细胞有很大的伤害。
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发表于 2011-11-30 23:14 |只看该作者
回复 eileenyangliu 的帖子% E% U' u! v, z& N% }# W4 `# a1 Z7 |
" A  D- E- U4 |( i3 [$ a: O, Y
我养的皮肤来源的前体细胞(SKP),我是将新生小鼠背部皮肤全部用胶原酶消化后用选择培养基来筛选目标干细胞。皮肤干细胞用植块发我真的是第一次听说过,也算是开了眼界。呵呵!
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