关于DMEM/F12培养液的灭菌

dmmwhb

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谢谢，我用的是低蛋白粘附膜过滤器，不知道行不行，正在试验中

have-a-rest

zxiaoxiao311 发表于 2011-11-29 12:58 2 E* t* |4 V; A# |
也可以先用粉配50mlDMEM/F12培养液，然后用O.22um的过滤器过滤后，在洁净操作台无菌操作加如胰岛素、EGF、牛 ...

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就这样做！

jxydiandian

一般不至于，你加的量到培养基后最终浓度很低的，不足达到被滤器截留的份儿

jxydiandian

而且这些蛋白的分子量也不大，其蛋白的大小也远小于0.22um的孔径

新疆八钢

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  K; E2 K6 `. q' z0 J) @9 p8 A9 x- y! ?" A( M- X: \6 m( G
用O.22um的过滤器过滤不用考虑大分子的损失，即使有些吸附不会影响培养液性质，我实验室做过对比没有影响

gandanxiaoyang

一般只是培养基过滤，至于要加的各种因子或试剂，应该是用无菌的溶液配制、无菌分装的。
" M% S# ^# M( c' [2 F; s5 @更为重要的是，这些因子在培养基中不能长期稳定存在的，所以，推荐即用即加，以保持最好的生物学活性。

pharmD

millipore 的膜，绿色和蓝色之分，其中一种对非特异性蛋白质吸附小。

yxzxlmlf

过滤一次应该没问题，我是先滤DMEM/F12后再加入胰岛素、EGF等，这些都是无菌包装的