胎盘分离的干细胞 - 是间充质干细胞吗？

leungyk

henryjia 发表于 2011-12-2 22:06 , p2 L" [, K3 |5 b4 u
不知道为什么，脐带动静脉，胎盘血管总是很难消化成单个细胞，即使消化出来。似乎单个细胞也都会死亡。很头 ...

9 W4 D( Z) S6 L" c( {/ ^. e4 e) ~
要消化臍帶動靜脈，似乎比消化臍帶困難！我有跟師兄學過做臍帶動靜脈，但不太成功。% m( l5 A) i' a
以我們做臍帶的經驗，collagenase 濃度跟消化時間都得重要，消化時間過長，細胞得容易死亡！

yunshi503

感觉有些细胞已经开始分化， 分化的细胞成多形性， 个别细胞好像还有senescence的现象。

henryjia

今天做了胎盘细胞流式检测：
4 l. G5 L6 }/ j/ C% A' g: g
& S2 E' w- U/ C# d2 m结果如下：5 S1 N% k* V8 R8 ^
阴性：CD31,CD34, CD45, VACM  g  H4 }  q; w  u4 E& g* x
阳性： CD90, CD105
% \9 t/ o+ G* c0 U& _) `弱阳性：CD146(10%阳性)
( S1 v; J' F$ d+ }
- _' T; H  c3 ^0 r( V7 U$ F形态绝大多数细长，很长，很象成纤维细胞。图片明天附上。请高人给指点一下这是什么个东东！
6 I5 Z; Y2 w, [4 h( |2 ~4 w7 V

yinjiqingqq

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2 J1 @5 T8 q( F' @- B" o, M
$ K  C, Y( N: f5 }; ]9 a: ["阴性：CD31,CD34, CD45, VACM* Q# G& R" f/ [- e* P4 ?
阳性： CD90, CD105"?阳性阴性比例是多少？这个很重要啊
: `. S. D9 s! E# Q1 d, O

henryjia

CD90 37% : 63% (-:+)
$ c7 ]; j3 {$ F: t3 g( V+ b5 @$ F# F
CD105 38% : 62% (- :+)7 U9 Q, K- D& s2 r' ~% ~
% y7 G9 F: w" l- \% n
细胞为元代培养未经筛选。

ruofan1982

我们实验室以前也分离过，从形态上看，大部分细胞像是羊膜上皮细胞，有些长梭形形的可能是羊膜间充质。

sanfa

看起来很像 9楼图 给力啊

qiqishichaoren

额，那个脐静脉消化是为了得到脐静脉内皮细胞吗？这个 弱弱的说一句，不是贴壁就可以很快爬出来吗，为什么去消化他？

shizhu198511

我养的也有这种形态，而且也是原代出现的，楼主传代后看看

相文

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6 k( X' q/ [. v% H- t, S0 p
5 A- G. j$ |$ t* c) U$ q4 l我感觉是的，而且状态很好啊！不过具体确定好像要做流试阿！能请教一下你是用多大浓度的胶原酶？消化多长时间？还有你做这个要调酶的PH吗？还要加其他酶吗？我以期用胶原酶做脐带间充干老是出不了结果，后面用胶原酶价透明质酸酶和中性蛋白酶才能出的。而用胶原酶做了一次胎盘污染理了。