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楼主: jiojoo
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[请教] 请帮忙分析下RNA电泳结果   [复制链接]

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31楼
发表于 2011-12-21 23:26 |只看该作者
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本帖最后由 jiojoo 于 2011-12-21 23:27 编辑 4 z* a* s  L  z( d7 W

  D& K* X& P" a3 K: u: }; H回复 linzi214 的帖子; R/ ]4 K2 ^0 p/ A) ]6 ^
: h  v5 h2 s) }4 e8 u, V
感谢!' b; }1 _9 l* M5 e8 M/ j* G
我现在提取的RNA纯度是非常好,浓度也能满足需要
0 _# ]7 Z( N8 M( b3 O1 v只是降解性一直没得到很好的解决,我用的EP管和枪头都是AXYGEN的,说是无RNase的- U# ?+ P3 D5 g8 x! \. a+ W- k1 C
我都是直接用,别人也这么用,也没出过问题* b" s# f5 h( R4 f& g! R4 }# k
有点不同的就是我的细胞量比较少,只有约20到30w
% G: g# @- P( r3 E0 S! ^! V% y7 B1 l0 Y$ \  l: f' e- F# D! D
此外,最近又出现DNA污染的问题,不知哪些情况会导致DNA的污染?是Trizol裂解的时间不够吗?
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32楼
发表于 2011-12-22 08:51 |只看该作者
抽提RNA用的PBS、ddH2O都用DEPC浸泡过夜,高压预冷后用。枪头可以用DEPC水浸泡后高压或直接买DNase/RNase-free的枪头,在抽提过程中要戴口罩,带干净的乳胶手套,如果接触其他东西的话喷一下酒精。操作台面和加样枪用酒精消毒后再用。一般没有问题的
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33楼
发表于 2011-12-22 09:05 |只看该作者
降解了不会有碎片的 还有 跑的时候电压调高 时间尽量短
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