怎样培养无feeder的小鼠胚胎干细胞？

lindan666666

我们都在做小鼠ES细胞哦，在MEF上长满后传到经过0.1%明胶处理过的48孔板上，克隆形态很好哦，用的都是加了LIF的ES细胞培养液哦。你先0.1%明胶处理20分钟，ES细胞消化好后直接接种过去就可以啦，一定要加LIF防止分化哦

shangchunhua

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7 Q; c/ D( x4 t9 g1 W# a2 J4 C! Q: q8 h* r# A. l
我指的是驯化的protocol，很多文章只是提了一下，都没有详细讲的。

lixf

我曾经养过无feeder的ES，先用明胶包被培养皿，再用加2i和lif ES培养基培养就可以了
3 q- h% j/ a2 O2 \. F- I4 x但是在无feeder的环境下只能支持2代，传到第3代时候，就会有细胞分化现象。

jjjk127

同感呀，也想无feeder养，可是养不好呀，求高手指点
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shangchunhua

回复 igdb 的帖子0 n& s* @$ x5 X% |+ }  i" Q4 S
* B- i. E4 }+ w4 x1 W
我分享一篇应其龙的文章吧

shangchunhua

回复 igdb 的帖子
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" Y2 e5 D- e; P3 KMillpore的一个驯化的protocol，不过要用专用的培养基

小猴子2421

您好，我可以问下您的2i/lif培养基配方吗？

细胞海洋

回复 小猴子2421 的帖子% D% \& a7 @, I- E5 S& F* G0 K9 i

! e9 w# l2 q& }2 Y1 F; p3 `* g建议你发新帖提问

splinkerette

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我也用的R1，但是直接养在gelatin上，感觉形态不是很好。请问用的什么牌子的血清呢？个人觉得血清的影响很大