对于贴壁较牢的细胞传代时如何消化？ - 实验室综合讨论区干细胞之家

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11楼

发表于 2012-1-17 11:24 |只看该作者

用细胞刮刀刮下来

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jinzi1984

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12楼

发表于 2012-1-17 11:43 |只看该作者

要么PBS好好冲，要么用两次姨E

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mansnoopy

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13楼

发表于 2012-1-18 00:17 |只看该作者

我来建议你一招很管用。就是加完胰酶后，将皿在墙上撞一撞，这样就下来了很好用，无需放入温箱消化

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sfk06

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14楼

发表于 2012-1-18 11:14 |只看该作者

可以适当提高胰酶的浓度，同时将消化中的细胞放入37度的孵箱中孵育30秒中（具体时间需要在细胞培养过程中摸索）

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siyubai1008

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15楼

发表于 2012-1-20 15:15 |只看该作者

0.25％胰酶冲洗一下，100ml瓶用大约3ml消化液先冲洗一遍

然后每个培养瓶加3～5滴消化液，9 p( V( c V0 u) Z T7 M: E+ z
; O) {% W+ y! m
置37°C培养箱消化1～2分钟，
6 C `4 r) [- y; S
吹打即可，效果很好

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zhouxiangya

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16楼

发表于 2012-2-3 09:42 |只看该作者

1、加胰酶前要用DPBS充分清洗，洗去残留的血清。
2、用胰酶原液，放37度消化，也可以适当多加点胰酶，最好消化时间控制在5分钟之内。

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蚂蚁小西

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17楼

发表于 2012-2-3 09:50 |只看该作者

对细胞伤害大的应该是胰酶，我们平常用的都是胰酶加了EDTA,你可以加大EDTA的量。

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ppmoshen

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18楼

发表于 2012-2-3 09:55 |只看该作者

DPBS充分清洗细胞，一般洗2~3遍，胰酶原液37摄氏度消化，如果还没完全脱落，轻轻拍打培养皿底部，将细胞拍下。

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dandan9230

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19楼

发表于 2012-2-3 12:41 |只看该作者

胰酶预热到37度。消化也是37度，PBS洗干净，一定要洗2min次，消化3-5min，拿出放置桌子上，摇晃。

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