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楼主: zarecol
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应用怎么样的培养技巧可以获得更完美脐带间充质干细胞   [复制链接]

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发表于 2012-3-12 12:02 |只看该作者
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/ F3 n7 i( Z8 C, j% Z. B3 n9 h- u1 c, v2 b) ], w
您好,我也是用贴壁法养脐带间充干,但是细胞一般到三代就开始变的扁平,粗大,没有立体感,感觉像是老化了,不知道问题在哪儿呢,是不是与用的血清有关系呢,向您请教一下?

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发表于 2012-3-18 17:45 |只看该作者
回复 sdwzg119 的帖子. y  r# M' x" Y, @# d

# J, d& l! C; Q- }- u! S7 e) c% m您好,您能分享一下您的培养基条件么,我养的脐带间充干细胞,传到第二代细胞就开始变得扁平,粗大,没有立体感,感觉是老化了,不知是哪儿的问题,我现在的培养条件是L-dmem+10%FBS(HYCLONE南美血源)+2ng/ml bFGF,请您帮忙分析一下原因,非常感谢!

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发表于 2013-1-16 15:26 |只看该作者
消化胰酶浓度还是用0.125%的好,以前用过0.25的,对细胞损伤较大,影响细胞后期的状态。
+ i4 a$ {8 v' k# q- p( {7 ]至于培养基很快变黄建议你还是往培养液里面多加一倍的碳酸氢钠,这样调节能力强一些。要不你就让厂家检测下CO2的浓度是否有准确,是否需要校准。
# ?. R% H0 s  @0 l, A; P   取细胞还是机械法和酶解法结合比较好,反正胰酶不值钱。呵呵
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发表于 2013-1-17 18:18 |只看该作者
回复 xbqian 的帖子
1 P5 Z5 T; \& j8 ~) R2 ?) W7 T4 G2 y, y
请教,这几种没的比例和浓度是多少?
& S9 |0 D& |; l% {: q
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发表于 2013-1-21 15:24 |只看该作者
回复 xbqian 的帖子) Z3 b- o! H# ^, h/ G$ `* u0 L' z& S

, W6 W; d; Z$ J/ }: @2 g, p请问你们所采用的三种酶混合的比例是多少呢?
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