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楼主: zarecol
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应用怎么样的培养技巧可以获得更完美脐带间充质干细胞   [复制链接]

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发表于 2012-3-12 12:02 |只看该作者
回复 ditiger 的帖子& @) w# J  l0 @3 l3 C3 i0 v& m: G
8 ], \+ J. C4 ^) X$ I- [, L; W2 b* Z7 Q
您好,我也是用贴壁法养脐带间充干,但是细胞一般到三代就开始变的扁平,粗大,没有立体感,感觉像是老化了,不知道问题在哪儿呢,是不是与用的血清有关系呢,向您请教一下?

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发表于 2012-3-18 17:45 |只看该作者
回复 sdwzg119 的帖子& W, x% k4 R  {# U

; W, ?3 e9 q6 p  X) w3 J& V; q您好,您能分享一下您的培养基条件么,我养的脐带间充干细胞,传到第二代细胞就开始变得扁平,粗大,没有立体感,感觉是老化了,不知是哪儿的问题,我现在的培养条件是L-dmem+10%FBS(HYCLONE南美血源)+2ng/ml bFGF,请您帮忙分析一下原因,非常感谢!

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发表于 2013-1-16 15:26 |只看该作者
消化胰酶浓度还是用0.125%的好,以前用过0.25的,对细胞损伤较大,影响细胞后期的状态。
  _& }$ \7 ]: T$ d至于培养基很快变黄建议你还是往培养液里面多加一倍的碳酸氢钠,这样调节能力强一些。要不你就让厂家检测下CO2的浓度是否有准确,是否需要校准。+ U: j/ a. |) r
   取细胞还是机械法和酶解法结合比较好,反正胰酶不值钱。呵呵
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发表于 2013-1-17 18:18 |只看该作者
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回复 xbqian 的帖子3 e' |/ C" a) r3 g5 [* l' l
4 N5 c, O$ r; R8 ]( g; s& W
请教,这几种没的比例和浓度是多少?
/ I$ A4 y% _: e9 U8 ]
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发表于 2013-1-21 15:24 |只看该作者
回复 xbqian 的帖子
6 H& V  s, r) ^1 e( R* s9 H2 c2 h/ G/ W" f: |3 r0 {
请问你们所采用的三种酶混合的比例是多少呢?
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