请教华通氏胶的剥离

lazyworm

剥胶确实是熟能生巧，练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的，有胶多胶少，有好分离不好分离，有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中，4度保存5、6天，质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。

lazyworm

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$ N' K$ W/ F) N5 d$ f每当打开个网页，回复个帖子都慢的喘不过气啊。

细胞海洋

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- w+ {( B9 a7 {
3 U# h( |1 {( \  g经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

lazyworm

回复 细胞海洋 的帖子9 T; B- N5 A1 Y1 Y

5 L7 q& k  m. n( R经常，可能是浏览量大的缘故吧，说明我们的队伍越来越强大了哈。

qiqishichaoren

回复 leungyk 的帖子, A& n1 V7 g9 y1 l
+ p9 X  H/ }6 k% H" Q7 V
放4度啊，要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗！有缓冲液就行了，最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了，里面加双抗。

单个核细胞

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* Z. l& W' d. Q0 B/ ]9 R5 T/ ^. c9 [7 \* s' l
从采集、运输到处理前置于4℃～12℃，不要超过48h，建议36h内，以便留下足够的时间进行处理。

ljj0558

我剥过两次，仅做参考：4 g4 m# S! c% {4 i
. U. P$ P7 p# F1.把脐带剪成小段，便于剥胶；: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L
0 I" n% i3 v" g  b$ c6 f& B2.纵向稍剪开外表皮，再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开，再进行两动脉和一静脉的剥离，该过程基本全是用镊子操作；! v" B) J3 h* L7 T
. x+ ~# }3 X4 w; y7 Q- n5 E7 |3.血管分离了后再剥胶，除去血管外，表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶；, n# {* Y, R( \0 G
- z9 b+ o3 [. h: b; W6 Q我们剥的胶是可以撕成条的，而且质地胶白，没有你说的粘粘的，估计是采样太久或没有保存好（具体的采样和保存我也不知道）3 D: n" G# p6 `
1 f9 L5 x$ J/ P! G0 C. X( ?只要把表皮撕开就好，不用剥离外表皮，直接把脐带摊开，再撕胶；6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?
1 h6 H( s+ M+ C) ~! O; n( E' C剥胶很费手劲，而且用力要恰当，撕胶的时候不要把表皮也带了；
# _! D9 e0 z; c# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥，静脉粗薄不好剥离，多操作几次就熟了
3 ~* h& C, C5 [4 }0 f6 K* ]
1 u" R2 |5 }. `7 R9 Z' m尽量剪成小段就ok了

上帝帮我转运吧

非常感谢大家的帮忙！

leungyk

单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16
1 c3 F" h3 n( ?5 e. e% X8 y2 R1 E回复 leungyk 的帖子
* t" b! \$ ~: I: E  {8 Y( C. U& k5 f
从采集、运输到处理前置于4℃～12℃，不要超过48h，建议36h内，以便留下足够的时间进 ...

% t& T6 p- K. f( W. t
謝謝！
- l* w4 M5 X' O) g- i' M- P, F其實我做過個小小實驗，存放在PBS+雙抗中，室溫下12h也可以，但當然效果不是太理想！
# {) e! e+ L; q& ?/ W+ X" j- X

bibottll

为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢？