请教华通氏胶的剥离

lazyworm

剥胶确实是熟能生巧，练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的，有胶多胶少，有好分离不好分离，有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中，4度保存5、6天，质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。

lazyworm

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每当打开个网页，回复个帖子都慢的喘不过气啊。

细胞海洋

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经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

lazyworm

回复 细胞海洋 的帖子$ |7 A# \6 q& x5 c2 ~
& n8 A2 R: f) }
经常，可能是浏览量大的缘故吧，说明我们的队伍越来越强大了哈。

qiqishichaoren

回复 leungyk 的帖子* k% U" n+ F5 O; C! G
4 G" v3 S( b' P3 v7 I! |7 A/ R/ I
放4度啊，要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗！有缓冲液就行了，最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了，里面加双抗。

单个核细胞

回复 leungyk 的帖子
7 \& Q. ^) d9 W/ \0 _5 z+ I  u( L: l& |& j
从采集、运输到处理前置于4℃～12℃，不要超过48h，建议36h内，以便留下足够的时间进行处理。

ljj0558

我剥过两次，仅做参考：4 g4 m# S! c% {4 i
% N# a. B2 G- j; n# a) z1.把脐带剪成小段，便于剥胶；: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L) p( U9 Q+ l& ?- u# @/ L  E& d
2.纵向稍剪开外表皮，再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开，再进行两动脉和一静脉的剥离，该过程基本全是用镊子操作；! v" B) J3 h* L7 T
0 X2 w* |9 p6 ~1 h. L6 I. K2 u3.血管分离了后再剥胶，除去血管外，表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶；, n# {* Y, R( \0 G
( P1 R; @& c+ Y8 l, h; E我们剥的胶是可以撕成条的，而且质地胶白，没有你说的粘粘的，估计是采样太久或没有保存好（具体的采样和保存我也不知道）3 D: n" G# p6 `3 b5 i$ q( `1 b; ~& K. w+ U
只要把表皮撕开就好，不用剥离外表皮，直接把脐带摊开，再撕胶；6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?
" I/ P' q/ c6 s; s! W- S& o" {剥胶很费手劲，而且用力要恰当，撕胶的时候不要把表皮也带了；
/ Z3 E( W6 s( Z$ w6 l8 V# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥，静脉粗薄不好剥离，多操作几次就熟了, }4 B0 Q7 H' Y: V

& Z( H$ T5 Y, A/ l9 @6 `. T8 |尽量剪成小段就ok了

上帝帮我转运吧

非常感谢大家的帮忙！

leungyk

单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16
4 Z1 {* f& e, F7 q  s回复 leungyk 的帖子$ ?$ k- `/ I& J: E
' e: i( M- [0 G! |  a; B1 O
从采集、运输到处理前置于4℃～12℃，不要超过48h，建议36h内，以便留下足够的时间进 ...

3 o' {; e7 q8 K: G* y謝謝！
8 p% q* g. }4 g0 @2 f+ e其實我做過個小小實驗，存放在PBS+雙抗中，室溫下12h也可以，但當然效果不是太理想！3 g) w, P: ^& y: R3 p/ r

bibottll

为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢？