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请教华通氏胶的剥离     [复制链接]

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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
剥胶确实是熟能生巧,练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的,有胶多胶少,有好分离不好分离,有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中,4度保存5、6天,质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。
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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
本帖最后由 lazyworm 于 2012-2-16 13:49 编辑
1 `9 N; k) b* _0 w/ x% L" ?% Q3 I
* v  i/ B  B1 K- G每当打开个网页,回复个帖子都慢的喘不过气啊。

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小小研究员

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发表于 2012-2-17 00:12 |只看该作者
回复 lazyworm 的帖子* p1 W0 Y9 U9 Z7 P8 X

8 s2 Q! C& b$ i9 T) S经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

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发表于 2012-2-17 09:17 |只看该作者
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回复 细胞海洋 的帖子
% v$ J2 I- I( V* ?" Q
; S/ U3 O' \9 K7 A经常,可能是浏览量大的缘故吧,说明我们的队伍越来越强大了哈。

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发表于 2012-2-17 09:52 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
7 h8 e! d' t4 d& @
0 R+ c( {) `) O4 `+ N放4度啊,要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗!有缓冲液就行了,最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了,里面加双抗。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-17 10:16 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子1 ?' v8 c4 B' y  E& n3 s8 w

3 _4 C7 J% }! ]8 p! w1 D: U8 T4 @2 Y; L从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进行处理。
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发表于 2012-2-17 10:57 |只看该作者
我剥过两次,仅做参考:4 g4 m# S! c% {4 i
' M) ^; ^, l' k4 M" o' A0 Z1.把脐带剪成小段,便于剥胶;: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L6 U8 ]" v& l8 j6 w7 @
2.纵向稍剪开外表皮,再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开,再进行两动脉和一静脉的剥离,该过程基本全是用镊子操作;! v" B) J3 h* L7 T
  u- s: m& ^9 P3.血管分离了后再剥胶,除去血管外,表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶;, n# {* Y, R( \0 G5 X$ z2 y) p, R
我们剥的胶是可以撕成条的,而且质地胶白,没有你说的粘粘的,估计是采样太久或没有保存好(具体的采样和保存我也不知道)3 D: n" G# p6 `1 J  V, r$ w& E* V
只要把表皮撕开就好,不用剥离外表皮,直接把脐带摊开,再撕胶;6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?
: I9 d6 n0 `4 j剥胶很费手劲,而且用力要恰当,撕胶的时候不要把表皮也带了;
" b# l! c4 |. U5 m3 K: H1 v# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥,静脉粗薄不好剥离,多操作几次就熟了2 r6 k, P& T( m

! A; D( I% O% y- p尽量剪成小段就ok了
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发表于 2012-2-20 16:38 |只看该作者
非常感谢大家的帮忙!

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发表于 2012-2-21 09:21 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16
* Z; H9 E3 l% Z1 W4 d' {, A. u# J回复 leungyk 的帖子
# ^, K. I9 a( m$ t- O% y% P  s# _4 j! w& [! n( `
从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进 ...
; }- i+ w  h! S- W
謝謝!1 c8 w: f& K, J, x# \! @
其實我做過個小小實驗,存放在PBS+雙抗中,室溫下12h也可以,但當然效果不是太理想!1 S7 `* A9 F) \
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发表于 2012-8-11 17:12 |只看该作者
为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢?
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