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请教华通氏胶的剥离     [复制链接]

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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
剥胶确实是熟能生巧,练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的,有胶多胶少,有好分离不好分离,有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中,4度保存5、6天,质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。
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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
本帖最后由 lazyworm 于 2012-2-16 13:49 编辑
8 l- ^# v) e* Y* E) X1 L$ D! U( {& l$ z! ~8 |  L
每当打开个网页,回复个帖子都慢的喘不过气啊。

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小小研究员

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发表于 2012-2-17 00:12 |只看该作者
回复 lazyworm 的帖子
. i. R4 e8 L4 a* p7 R3 F
# y- a0 h' u1 [/ g3 H经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

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发表于 2012-2-17 09:17 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子' Y) F' P6 J0 U

+ I! B4 F# ^, R( B) C, C* {* V经常,可能是浏览量大的缘故吧,说明我们的队伍越来越强大了哈。

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发表于 2012-2-17 09:52 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
8 P% x5 p3 t5 E' p2 o* Y& A
5 T3 D2 F. ]4 \7 n- e放4度啊,要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗!有缓冲液就行了,最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了,里面加双抗。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-17 10:16 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
# I5 w: X: s! @0 V/ c% D% Z  h4 K1 Q& D4 m$ |  M
从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进行处理。
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发表于 2012-2-17 10:57 |只看该作者
我剥过两次,仅做参考:4 g4 m# S! c% {4 i" `% w* \, F6 A' p& x0 ~& N
1.把脐带剪成小段,便于剥胶;: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L, ?1 v' R3 b5 m6 p
2.纵向稍剪开外表皮,再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开,再进行两动脉和一静脉的剥离,该过程基本全是用镊子操作;! v" B) J3 h* L7 T
' ^* \/ x7 g, l' G8 O# q3.血管分离了后再剥胶,除去血管外,表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶;, n# {* Y, R( \0 G
( d+ }0 U5 `# O2 v我们剥的胶是可以撕成条的,而且质地胶白,没有你说的粘粘的,估计是采样太久或没有保存好(具体的采样和保存我也不知道)3 D: n" G# p6 `- p& R5 E: M( w$ l& \. z
只要把表皮撕开就好,不用剥离外表皮,直接把脐带摊开,再撕胶;6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?6 c1 {: A: f7 k8 |& `/ ]
剥胶很费手劲,而且用力要恰当,撕胶的时候不要把表皮也带了;
5 V; P- A9 r" z2 |0 A6 o# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥,静脉粗薄不好剥离,多操作几次就熟了/ i- A; \: @" Q  a' E
, h4 @' t- ~/ s% m
尽量剪成小段就ok了
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发表于 2012-2-20 16:38 |只看该作者
非常感谢大家的帮忙!

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发表于 2012-2-21 09:21 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16 + D5 ^2 u; g8 [4 d; `* p
回复 leungyk 的帖子
+ c: F4 I5 b; \  j6 d1 t3 B
% L( V; S) y. ~从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进 ...
# E/ R# o* i; l: g/ Y  h) H
謝謝!" K0 u+ Z" }8 B# L- T4 B! x
其實我做過個小小實驗,存放在PBS+雙抗中,室溫下12h也可以,但當然效果不是太理想!
, q5 @% P# {/ o. [
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发表于 2012-8-11 17:12 |只看该作者
为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢?
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