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楼主: huangcong1988
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发表于 2012-2-15 15:48 |只看该作者
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: ]( Y" r% K/ Q- }) W
; Y4 M& h1 k! b- p+ S6 N我们一般不会全配了的。一般是称量500mg后,加10ml无菌水,0.22um过滤后分装。& Z# ~4 O# i6 y8 s
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发表于 2012-2-15 15:58 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子6 x5 N% j* p. C8 y  `
' {# j# _+ }( o0 ]! Q* n
您的意思是,直接在25g的棕色瓶子里加水?不可能的,那能加多少水呢?关键是,Vc很容易氧化的,1g都会用好久,那都配成水溶液不都被氧化了。; `' J4 q4 j+ b$ z0 G) Y/ R
本来这就不是个无菌试剂,更不会检测是否含有支原体。做ips最怕的就是支原体了。- {; t2 v; @5 H6 \
我不知道大家在外面称量后配制再过滤后给细胞有什么后果,我想着是不敢给ips的。
/ s1 U% |: ?7 V# m. l! Q. F本来我也是想配成母液的,用的时候稀释。也可能您的意思我没看懂吧,谢谢。
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发表于 2012-2-15 16:02 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子9 ?, q: Z3 Y2 w
6 [4 n; B' z7 x) S) F3 C3 {5 B/ _3 [
我也曾经担心你所考虑的问题,我们一般是在细胞间称量,支原体污染的概率很小,实践证明是没有问题的,当然,你可以选择0.1um的滤器过滤,可以除去支原体的,不过那种滤器挺贵的。
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发表于 2012-2-16 09:07 |只看该作者
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回复 白巧克力 的帖子
3 L  i; ^7 y9 J
+ w3 b  J! \* N! h) N您那个25g的棕色瓶不是很大,是吧?可能我考虑得不是很周全,我的意思是:如果瓶子不大的话,您可以先少加点水,然后再吸出部分稀释。我看论坛里面说Vc形式对了的话,保存还是比较容易的,不知道是不是您Vc形式对了吗
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5 T% [9 h7 H0 o" @
1 m* R8 I- ~* ]7 R3 {) W6 [1 S离心
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回复 huangcong1988 的帖子7 Z3 D+ q9 ]2 G" |5 t8 S: X

/ R# P! N  ?$ R4 b, R恩,我也是先在原瓶里稀释,然后再稀释...
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发表于 2012-2-16 21:31 |只看该作者
回复 song58 的帖子' g- X9 J& Q# W
: t2 E7 |1 K! [; ^6 C( K# w; S
怎么离心呢?10g装的瓶子比较大,没法离啊,还有原瓶稀释加多少水呢?配成浓度多少的母液?

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发表于 2012-2-16 22:05 |只看该作者
易氧化的试剂建议最好不要全配了,取1g配成母液,分装后取一部分配成应用液。或者1g全配成应用液,分装后冻存。在台面上轻轻敲几次,把瓶盖的粉末可以敲下来,如果不是完全配掉的话,也可以不用太管盖子上的粉末。不知道瓶子有多大,不行的话可以放在15ml或50ml离心管里,进行离心。
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发表于 2012-2-17 14:39 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子
5 p+ c1 o# `; b9 r8 |
1 E" Y  Q' z9 l2 E8 d. Q/ \0 l" E不知道瓶子多大,也不知道你们那离心机多大,这个建议不好说: P% n/ L4 |% z! o
以前我们实验室人多,Vc用量也大,所以一次会配很多,然后同学们领着用,不知道你们实验室什么情况,不过总能有合适的办法解决问题嘿嘿
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