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楼主: huangcong1988
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发表于 2012-2-15 15:48 |只看该作者
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回复 huangcong1988 的帖子3 \8 H, i& D+ l' ^

9 w- L1 O9 Q& ], b8 X! Q我们一般不会全配了的。一般是称量500mg后,加10ml无菌水,0.22um过滤后分装。
& H6 C1 G% U( D; U. [, E+ s9 u
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发表于 2012-2-15 15:58 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子' {' _8 c, D& g; s3 A( K

" G: D% k0 L" w; t' u" _. K6 l8 X( `您的意思是,直接在25g的棕色瓶子里加水?不可能的,那能加多少水呢?关键是,Vc很容易氧化的,1g都会用好久,那都配成水溶液不都被氧化了。
- O1 p7 m5 o& v本来这就不是个无菌试剂,更不会检测是否含有支原体。做ips最怕的就是支原体了。3 T; h4 z  }2 S+ ?4 j1 C
我不知道大家在外面称量后配制再过滤后给细胞有什么后果,我想着是不敢给ips的。8 Y8 O6 m# R  |5 B
本来我也是想配成母液的,用的时候稀释。也可能您的意思我没看懂吧,谢谢。
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发表于 2012-2-15 16:02 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子. K+ y" A; z5 p7 F
7 C. ^# B- m' c5 X
我也曾经担心你所考虑的问题,我们一般是在细胞间称量,支原体污染的概率很小,实践证明是没有问题的,当然,你可以选择0.1um的滤器过滤,可以除去支原体的,不过那种滤器挺贵的。
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发表于 2012-2-16 09:07 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
' _0 v8 S4 o4 P% O( Z, U7 Q" z1 y, Q% I* j
您那个25g的棕色瓶不是很大,是吧?可能我考虑得不是很周全,我的意思是:如果瓶子不大的话,您可以先少加点水,然后再吸出部分稀释。我看论坛里面说Vc形式对了的话,保存还是比较容易的,不知道是不是您Vc形式对了吗
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发表于 2012-2-16 14:01 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子2 e5 S: [" H1 D" y; j* O
0 ^& S( V$ |4 x3 D2 K
离心
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发表于 2012-2-16 14:02 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子' [3 U3 _* F6 S, g8 Y( l

+ v- P+ _) j) U$ D" E恩,我也是先在原瓶里稀释,然后再稀释...
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发表于 2012-2-16 21:31 |只看该作者
回复 song58 的帖子# ~# G6 M% G# O/ y6 t3 j
( |3 s, x7 z- m* [5 o, o; b% ^
怎么离心呢?10g装的瓶子比较大,没法离啊,还有原瓶稀释加多少水呢?配成浓度多少的母液?

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发表于 2012-2-16 22:05 |只看该作者
易氧化的试剂建议最好不要全配了,取1g配成母液,分装后取一部分配成应用液。或者1g全配成应用液,分装后冻存。在台面上轻轻敲几次,把瓶盖的粉末可以敲下来,如果不是完全配掉的话,也可以不用太管盖子上的粉末。不知道瓶子有多大,不行的话可以放在15ml或50ml离心管里,进行离心。
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发表于 2012-2-17 14:39 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子
: |$ x3 ]) L7 l
, Y  g4 L" [2 D. a% g5 b不知道瓶子多大,也不知道你们那离心机多大,这个建议不好说0 a3 {6 U9 s  f. i- F
以前我们实验室人多,Vc用量也大,所以一次会配很多,然后同学们领着用,不知道你们实验室什么情况,不过总能有合适的办法解决问题嘿嘿
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