脐带间充质细胞贴壁法出芽率怎么这么低？？

shizhu198511

brian111 发表于 2012-2-28 09:58 2 \8 {: U+ z8 y, j& W; L# P
我们之前用的那种弯头的小剪刀，把华通氏胶剪成尽量小的块，越小越好，但是时间不要太长，也不能让胶干了。 ...

; t, `! q% O% @1 X8 M
你好，请问你用什么商品培养基，货号是多少，还有你们用什么牌子的血清？
6 _" j. Y: C& y$ [. e" b/ ]  t; v- V# I  G, I+ q

# Z, A" K: g3 l" o# h/ r* q多谢！！！

brian111

回复 shizhu198511 的帖子/ w, s) S/ i, T, v* @

" \( V+ R9 H& Q6 y1 `我给你发私信吧，免得人说我给人家打广告

zhanglei1414

你把皮和血管去干净，胶先剪碎，然后拿镊子夹着往板子上一个一个放，大块的胶块再补上两刀切小，胶块周围留间隙，用好点的进口血清，如果不是全长出来的话，你给我两刀！如果胶块从板子上掉下来成悬浮的胶块，那一个也长不出来！

owenlion

告诉你： 1.脐带放置了多久时间；2.脐带大小，不太小，也不要太肥大；3.组织团块密度，这会对

shizhu198511

zhanglei1414 发表于 2012-2-28 20:19
. O1 O/ E' X8 U+ g" j* J你把皮和血管去干净，胶先剪碎，然后拿镊子夹着往板子上一个一个放，大块的胶块再补上两刀切小，胶块周围留 ...

3 @  k# b5 w& D
谢谢lei哥，说话挺幽默的，请问你用的什么培养基和血清呀，我用的是α-MEM（GIBCO）+国产10%FBS，

shizhu198511

owenlion 发表于 2012-2-28 22:25 , ~/ {8 F! O, P+ d0 s' `
告诉你： 1.脐带放置了多久时间；2.脐带大小，不太小，也不要太肥大；3.组织团块密度，这会对

# ?. Q4 _9 I: f! k: _! k* X
谢谢你呀，脐带是产科取得，这个不好说新鲜度1-3小时吧！脐带大小都是1*1cm(只能是尽量），不敢保证每块都是，组织块密度大概就间隔1cm左右！，请指点!

owenlion

回复 shizhu198511 的帖子4 ]9 Y0 w: X. I0 S  n

2 G! A5 S* S: Q  y, h. o5 {2 w3 T48h内的脐带都好。1cm3太大了，芝麻或米粒那么大，再大一点点就可以。多少脐带接种到多大培养器皿中？90%的组织块应该长出。但是组织块需要贴壁，如果不贴是不容易长

shizhu198511

owenlion 发表于 2012-2-29 17:09 8 n; Q+ W0 B9 @2 G. [% o# t3 A! s
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. C/ w) ?( R& ]0 D: i, i! s6 e) n! A/ m# K9 N' ]# C7 z( f. z) v
48h内的脐带都好。1cm3太大了，芝麻或米粒那么大，再大一点点就可以。多少脐带接 ...

, I9 t+ B9 }  \- }3 v1 `) q5 C
谢谢指点，组织块是大点了，组织块密度大概就间隔1cm左右，一般一根脐带分的好的话就接种3个大皿里，3个小皿，我最做一个是这样的

crazytime

你可以放的时间久一点，一般不会是同时爬出细胞来得，不要经常动培养瓶或培养皿

owenlion

回复 shizhu198511 的帖子5 d$ `7 D/ y4 S  a$ p

, b8 A0 a- S2 {* n8 x3 g脐带组织块剪碎后，离心去上清，按1~1.5ml组织块接种到75-100 cm2培养皿里。组织块过多，培养液容易变黄，我估计你是接种量过多。接种后每天观察，一个礼拜应该看的见细胞爬出。我们用国产血清也养的很好。