脐带间充质细胞贴壁法出芽率怎么这么低？？

shizhu198511

brian111 发表于 2012-2-28 09:58 5 {6 t8 g2 C& Q( Y4 b" W4 ^
我们之前用的那种弯头的小剪刀，把华通氏胶剪成尽量小的块，越小越好，但是时间不要太长，也不能让胶干了。 ...

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你好，请问你用什么商品培养基，货号是多少，还有你们用什么牌子的血清？7 ~7 m- A5 g  ]/ g8 S

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% U- V$ p! i& i/ C* p7 U多谢！！！

brian111

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我给你发私信吧，免得人说我给人家打广告

zhanglei1414

你把皮和血管去干净，胶先剪碎，然后拿镊子夹着往板子上一个一个放，大块的胶块再补上两刀切小，胶块周围留间隙，用好点的进口血清，如果不是全长出来的话，你给我两刀！如果胶块从板子上掉下来成悬浮的胶块，那一个也长不出来！

owenlion

告诉你： 1.脐带放置了多久时间；2.脐带大小，不太小，也不要太肥大；3.组织团块密度，这会对

shizhu198511

zhanglei1414 发表于 2012-2-28 20:19 ) P. ]+ d6 @  r& q  q
你把皮和血管去干净，胶先剪碎，然后拿镊子夹着往板子上一个一个放，大块的胶块再补上两刀切小，胶块周围留 ...

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谢谢lei哥，说话挺幽默的，请问你用的什么培养基和血清呀，我用的是α-MEM（GIBCO）+国产10%FBS，

shizhu198511

owenlion 发表于 2012-2-28 22:25 . c: \! \1 {7 ~
告诉你： 1.脐带放置了多久时间；2.脐带大小，不太小，也不要太肥大；3.组织团块密度，这会对

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谢谢你呀，脐带是产科取得，这个不好说新鲜度1-3小时吧！脐带大小都是1*1cm(只能是尽量），不敢保证每块都是，组织块密度大概就间隔1cm左右！，请指点!

owenlion

回复 shizhu198511 的帖子7 J3 K# L1 [' r: |
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48h内的脐带都好。1cm3太大了，芝麻或米粒那么大，再大一点点就可以。多少脐带接种到多大培养器皿中？90%的组织块应该长出。但是组织块需要贴壁，如果不贴是不容易长

shizhu198511

owenlion 发表于 2012-2-29 17:09 5 Q" }) p0 ~6 {6 Z+ h, o
回复 shizhu198511 的帖子3 {. i7 o8 ^* x0 x6 a
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48h内的脐带都好。1cm3太大了，芝麻或米粒那么大，再大一点点就可以。多少脐带接 ...

5 t/ F4 U2 A% V3 t谢谢指点，组织块是大点了，组织块密度大概就间隔1cm左右，一般一根脐带分的好的话就接种3个大皿里，3个小皿，我最做一个是这样的

crazytime

你可以放的时间久一点，一般不会是同时爬出细胞来得，不要经常动培养瓶或培养皿

owenlion

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  Y3 g0 P  |4 v# N脐带组织块剪碎后，离心去上清，按1~1.5ml组织块接种到75-100 cm2培养皿里。组织块过多，培养液容易变黄，我估计你是接种量过多。接种后每天观察，一个礼拜应该看的见细胞爬出。我们用国产血清也养的很好。