胰蛋白酶EDTA对我的EPC居然不起作用？！

lcxlorna

完全同意上面xbs530515 的说法，先用消化液润洗细胞一次，弃掉。再加入新的1ml液体进行消化，放在培养箱，每隔几分钟注意观察一下消化进程。或者把消化液预热一下，同样做法，会加快消化时间。

henryjia

谢了，明天试试

杨磊1

以前也遇到过这个问题，先从酶的浓度考虑，然后在考虑培养瓶。如果两者皆无改变，应考虑此细胞是否你需要的细胞。这是我师傅交我的。

542177563

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4 a1 ^' j( i! B% y( c+ N9 Q, a7 I) R0 g3 x: Y
你好，请问你是什么来源的EPC？

henryjia

脐带血
/ p( W4 q2 q' U5 k

穿越地平线

建议0.25%的胰酶-EDTA

穿越地平线

最多3分钟

刘艳85

先用生理盐水将细胞洗涤一两次去除残余的培养基，然后再用胰酶消化

wind789

henryjia 发表于 2012-3-7 21:17
, \" |7 Y1 \5 a/ E3 M: T6 ]似乎有很多圆形成骨细胞，怎么去除呢？( E8 c$ d( }# w% {- M! G; N6 F
& P! Y: w+ Y) l& @& X
说明一下，我是希望可以从脐带血中提取MSC

- s& F  J" w) `这种细胞不好消化，温箱半个小时都不行。直接细胞刮刀吧。

almasun97184

你那个真的是内皮细胞么？内皮细胞是很好消化的细胞。我养的脐血EPC都是必须把胰酶EDTA稀释5倍以上才行的，不然消化后细胞状态会渐渐不好。
+ w0 y" U" a3 V1 T- b8 D通常先PBS洗一次，用预热了的0.01%的胰酶EDTA，在培养箱里放1分钟，拿出来观察细胞就基本都变圆了。
) x* t2 [; Z0 B9 B* _建议你原位用免疫组化检测一下。