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楼主: 暮色英雄
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[请教] 请教!我用无血清培养基养的胃癌原代细胞,为什么会出现这种小颗粒?   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-3-7 13:26 |只看该作者
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回复 evial 的帖子6 F( @: _+ P6 M

$ c5 Y& F8 A9 U& O+ V冲洗?我是取一个6cm的培养皿,在里面加入PBS,然后将肿瘤组织放在里面浸泡,然后再换一个装有PBS的培养皿浸泡组织,这样是不是不行啊?
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12楼
发表于 2012-3-7 15:19 |只看该作者
试试如果肿瘤块没有那么小,短暂浸一下医用酒精
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13楼
发表于 2012-3-7 16:53 |只看该作者
回复 暮色英雄 的帖子0 G" j7 d9 F5 W( n- c; m: n
$ ?! h$ v5 R4 s6 e
PBS里最好也加P/S双抗。
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14楼
发表于 2012-3-7 19:31 |只看该作者
回复 holywater 的帖子
' e" R/ V7 ^  w( D9 ?( A
, Q% Z& v, B: b" O6 Z是胶质瘤,脑袋里面取出来的,很脆弱

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15楼
发表于 2012-3-7 20:25 |只看该作者
看了上面的回答我真是要吐血了!是不是没有上过医学院?
: q/ D! K) \4 X& U人体组织怎么可以用酒精泡!!!你的伤口用酒精擦擦看看什么感觉?酒精会损伤组织的还怎么样细胞?而且只是一般消毒起不到灭菌作用,别以为实验使用的酒精就是灵丹妙药!; c- h+ J4 m; Z0 q
这样浸泡根本不足以去除细菌,你想一碗面上漂的油,把面捞出来放在另一个汤碗里上面还有漂油么?还是有的啦,也就是说人胃里粘膜上有很多细菌,这在整个消化道都是生理性的正常的,但是对培养细胞不利,细菌也不会因为泡PBS就死了。唯一方法就是用流动水冲洗!别不舍得PBS,提着组织用针筒吸了PBS冲5分钟,基本可以将细菌概率降到最低。
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16楼
发表于 2012-3-7 20:27 |只看该作者
看了上面的回答我真是要吐血了!是不是没有上过医学院?. H+ t$ z4 o7 D! |# K4 t
人体组织怎么可以用酒精泡!!!你的伤口用酒精擦擦看看什么感觉?酒精会损伤组织的还怎么样细胞?而且只是一般消毒起不到灭菌作用,别以为实验使用的酒精就是灵丹妙药!
1 ?' g& `7 [$ z* q0 j& [这样浸泡根本不足以去除细菌,你想一碗面上漂的油,把面捞出来放在另一个汤碗里上面还有漂油么?还是有的啦,也就是说人胃里粘膜上有很多细菌,这在整个消化道都是生理性的正常的,但是对培养细胞不利,细菌也不会因为泡PBS就死了。唯一方法就是用流动水冲洗!别不舍得PBS,提着组织用针筒吸了PBS冲5分钟,基本可以将细菌概率降到最低。

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17楼
发表于 2012-3-7 20:28 |只看该作者
你不是说胃癌么?怎么又变成胶质瘤了?脑子里出来的绝对无菌,把血冲洗掉就可以了。脑子里出来还有细菌病人要得脑膜炎了
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18楼
发表于 2012-3-8 12:42 |只看该作者
本帖最后由 holywater 于 2012-3-8 12:46 编辑 3 e. H( X0 g8 H4 n# L! T8 J& Z

- c  B; a9 _- ~5 w: k# v& Q5 d回复 evial 的帖子
5 x: T, c' K3 _7 s6 L* |  \+ j" F) h- o- _1 d
5 i( ]9 t0 A1 b$ B" |9 q* M$ \  y" U
看了上面的回答我才要吐血呢,你不看题目,就莫名批评人,怎么能做好实验
' z+ y5 K+ O, p" j! A% z
- n/ q' b8 X! X& q- q  u) {4 b9 f楼主是肿瘤细胞原代培养,不是要给人手术缝合!题都没审好就乱叫。5 R7 N9 v# z4 c! _$ o$ k

  j$ W) j8 A/ ?& c7 n3 Z5 @) c( ~$ o组织培养用些表面消毒剂很正常。PBS冲洗,你洗多少次也是降低污染概率而不是除掉污染" ~( Q4 [% n2 l9 O! \3 U
: W7 m, z- e+ `$ p+ s! G
9 h. `# |) `) ^# f; R
你有没有学过组织培养啊,酒精是表面消毒剂,如果肿瘤块不是那么小,酒精浸泡个半分钟一点事情都没有。我原代培养时候经常泡酒精消毒老鼠" ?/ B( X  d) n7 Q& V

* V4 _5 l  n% P+ y9 ~6 f9 I* n) x6 Y) x植物组织培养还用氯化汞消毒呢,你怎么不批评一下?
) G7 F5 u; t( S# V, j  [  a3 p+ j! W8 F7 `2 J
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19楼
发表于 2012-3-8 12:51 |只看该作者
为什么我到哪儿都遇到这种人,题目都不看好就乱反对别人的?还你有没有做过手术,我没做过手术但是我做过200次的神经元原代培养!" R- M  y; o  F

0 c' y" z1 z* d" }论手术,我可能只会用菜刀切猪肉,但是论原代培养,那你就像婴儿画画。

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20楼
发表于 2012-3-8 13:39 |只看该作者
脑组织是无菌的,只要注意无菌操作应该是不会污染的,而胃黏膜是有菌的。小鼠可以酒精浸泡一下再取骨髓。你试过在培养基里面加点酒精或者其他消毒液看看细胞会不会死?
$ ^. X# y- }. g4 l这和审题有关么?你写的内容已经给大家看到了么,你写了标题没有啊,大家都没看到你有标题么!
4 P8 R7 w- r7 I那本老外写的protocal我们一起看看吧,那里写着用来培养的组织块可以用酒精或其他消毒液泡?
% I( S5 `5 i. K2 X# h! z. u我是外科的,酒精在消毒剂中不是最强的。培养房的表面消毒我们用次氯酸钠消毒片做的水擦洗,连肝炎病毒都可以杀死,你要不试试用来泡组织?# \. L0 w9 @1 q. Z
干细胞之家是交流学术的场地,不是小朋友吵架的。做科研和做人都要踏踏实实!
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