关于 使用流式细胞仪分选人类女性生殖干细胞

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# V8 U. C1 b7 x. j  A( H8 h回复 leisong12 的帖子6 N8 P# t4 c$ H8 p0 m$ ~

4 g9 p1 ]: }8 {2 s$ e     对啊。。。我同样纠结于此啊！！！！我还在想我是不是关于流式的知识太少了，所以理解不了，问了好几个同学，都搞不清楚这是怎么回事。握个手先！至少知道不是我一个人被作者弄晕了。。呵呵   谢谢这位朋友了！ 不过作者说图中 那个Anti-rabit-APC  是用来排除自发荧光的，不知道改如何理解。。

cneagle66

1 f$ {$ t7 z: g% t: i

3 M9 X, ~" b2 }) u2 I' j对于这3张图，发表些自己的看法。
) n6 ]0 u5 I( {4 O5 i) u  i: T对于活细胞，从染色看，第一张只加COOH端抗体-APC，所以按照文字，应该是细胞在APC纵轴上移，（而后作者说是印刷错了，真的么？）中间张图，只加NH2端抗体，488几乎无细胞染色，所以从前两张图上看，应该是COOH端可以在胞膜上检测出来，而用NH2端抗体检测不到阳性细胞。所以，我觉得作者给你回信说是印刷错误，也不好解释这两张图。
. u5 t- w5 P- i6 O1 B( Z第三张纯粹是穿孔染色的对照。$ l1 p$ \' i4 Z* E) c" `- L4 i* i
他用这两个颜色染色，就用他们做纵横轴，我觉得没有什么问题。4 q# ?9 t1 b" L+ R
阴性区域为什么那么小，我想应该是用无染色的对照划定的区域，不影响结果判断。  d! S; S/ h* [4 g4 d& T! L0 m8 U

" l. f$ z5 z; H; K6 s% ^结论，图的确有问题，怎么解释只有作者知道，暂时相信他的结论吧，自己重复实验以后才知道。
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9 T, q! A5 p3 `. |% h! l另外，若有新的发现，还请来这里告诉大家一声，一起进步啊！

leisong12

"那个Anti-rabit-APC  是用来排除自发荧光的，不知道改如何理解"       这个也有可能，我没有调查过该细胞自发荧光光谱范围，但是可以单看APC标记，发射波长660nm, 个人认为动物细胞自发荧光不会达到该值，所以用APC标记的抗体检测不会与自发荧光重叠。Alexa Fluor488发射波长519，PE是575，很可能与细胞自发荧光发生重叠。但是实验都是会设置对照的，应该没有这个问题啊，真不知道作者想说什么？

chenchunlei

我这周就讲这篇文章，对于这个抗体分选的OSCs图也看不懂，本人觉得figure1中的C图COOH分选的阳性细胞应该在阴性细胞的左上方