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楼主: 冠忠
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CIK 细胞图片   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-3-21 10:56 |只看该作者
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回复 冠忠 的帖子
0 X8 ~  g; [* Y9 q
( @$ @7 G6 F2 Q% ^1.细胞数量都会增加,但CIK细胞数量所占比例也会增加,具体增加多少需要做流式检测。
; Z" f4 ~3 f  p* B& L2.可能是一些细胞团吧,能弄散最好弄散,一般好像补液或换液后会自动分散开。4 i7 C/ \" q/ C  Z2 t8 d
3.我看的文献上有说加IL-2的,你可以试验一下加不加有区别没。
+ S3 Z! e# X- P4 |4.这个当然可以,不过最好不要被染菌了
) |* i0 w: M$ i5.你可以在显微镜下看看,细胞浓度大的话,可以换啊,,小的话就算了,别浪费。8 R- O* P# v" {, o+ f0 @
以上仅供参考。
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12楼
发表于 2012-3-21 16:05 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子( s1 \' C% \' k
2 y) {+ E3 C& s/ h
从你的图片来看,黑色团不是细胞是培养瓶盖子上掉下去的一些黑色朔料!你的细胞碎片很多,可以收集处理!加新的培养液!以后达到密度后半量液传代就行!最后在细胞对数生长期一天一传得到目标量的细胞!
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13楼
发表于 2012-3-21 16:49 |只看该作者
看细胞密度,还可以再长。如果现在半量换液细胞密度可能会比较低,不利于生长。
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14楼
发表于 2012-3-22 01:08 |只看该作者
谢谢各位师兄赐教,小弟获益良多。
7 P; h+ t$ ]* ?
: Q) [5 _. M+ L9 s; S9 O/ S+ v  o4 \( E我想再了解:
) i+ F- ^( J5 ~1 p8 E+ B
& P* j% B& m; \* }1.        我知道培养细胞之浓度最好是1x10^6/mL,我是用血球计数器(hemocytometer)去数细胞,但是大家都知道,细胞数量可以很大,请问是否要稀释好几倍先可以数细胞?
- ^( p& o& |- K0 s4 J0 C4 B# G1 e% [: i  \1 N  e' y0 a' D! `
2.        我想问一下,过了几天后,细胞增值速度是多少?:一天一倍?还是几天一倍?, `: X, S$ H2 e0 i+ j  Z% M

2 F0 `, Z* `8 }& I0 [: Q3.        有关细胞碎片,请问是否用离心换液就可以处理好?为什么会有那么多细胞碎片?可以预防吗?
' K$ W8 Q3 p' S+ k0 Z+ K
) Z9 K2 X. V) w, g. r" ?# v' w4.        请问CIK妯胞在浸在PBS环境里,室温,可以存活多久?4 D5 z8 G4 y7 ~! k) e! d

  m  `& Z; b* N谢谢大家0 U4 D' z- T& g. b& p+ i
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小小研究员

15楼
发表于 2012-3-22 22:46 |只看该作者
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  a$ g$ |3 C3 m6 F
  z0 E9 C/ H3 ?建议你发新帖提问

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16楼
发表于 2012-3-24 10:37 |只看该作者
我看着像细胞结团了
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17楼
发表于 2012-3-29 16:48 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子# ^6 {. T" l* H2 S' d% D6 U% M+ `$ Z8 L

+ w/ J6 W8 }0 ~2 a8 g+ w. u+ G5 v- q# O1. 用CD3单抗和IL-2刺激是以扩增CIK细胞为主,但是T细胞也会增多。5 `( S7 @/ W+ n  a6 E+ F
2. 是克隆团,长的特别大的时候要吹打一下,防止里面细胞生长的不好。! J! G' [/ x; d% l' D
3. 实验证明不需要0 k, ~! T7 M' y( v1 o
4. 一般是3天直接补液进去,关键还是看颜色是否变黄,密度是否大。
7 b, y3 |1 C% ?8 M; t& Q$ t
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18楼
发表于 2012-8-20 11:12 |只看该作者
黑色的团块是淋巴细胞增殖的团块的,并不是所谓的什么掉下去的塑料,这是好现象,团块都上浮的时候可以吹散,让DC作用到更多的淋巴细胞,长成CIK。
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19楼
发表于 2012-8-20 12:48 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子; ~. `% ~2 K3 ?) h1 E4 I* ~
  a' b- C# N2 M1 {+ ]
1. 我们是用的血液分析仪计数的,用计数板的话我觉得应该稀释后再计数。. q2 L$ X* x' r' n( ^: F0 M# L* q2 ?
2. 我们养的CIK是两天翻一倍。
% A% l! p( R! B- m# l) y- R3. 细胞碎片的存在是正常现象,只是操作好的话会少些。在换液时我们进行对比过,离心会对细胞造成损伤,从而增加细胞碎片的量。因此换液时不再离心。0 @. y7 J  F# }% f# X
4. 这个问题我也不知道,没做过,期待高人指点。
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20楼
发表于 2012-8-22 09:53 |只看该作者
1.关于数目的增加,所有的单核细胞都会增殖200-300倍,+ i6 }* G7 v4 c. i# `5 r: K, m% x
2.图中的黑色球状无为细胞碎片的聚集物,离心换液后会消失的。你上面的那张图我自己觉的应啊做个半量离心换液最好。
/ f9 M, a8 R; _# ^2 F9 a# Y8 s3.显微镜下观察细胞的生长状态,密度,培养基中细胞碎片的多少来决定是否需要换液、传代。
! C4 e' S- N* a, m4.我建议每4-5天半量换液一次(除非细胞非常的少,但也需要补充因子。)。也需要补充因子。
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