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楼主: 冠忠
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CIK 细胞图片   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-3-21 10:56 |只看该作者
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; h! J/ D! A# T% F5 g# T, c# L& {3 |& x
1.细胞数量都会增加,但CIK细胞数量所占比例也会增加,具体增加多少需要做流式检测。
* ~( L& e5 V; Z' V2.可能是一些细胞团吧,能弄散最好弄散,一般好像补液或换液后会自动分散开。
$ t( P: ?$ N: c3.我看的文献上有说加IL-2的,你可以试验一下加不加有区别没。  X2 V6 y( C" H) ~
4.这个当然可以,不过最好不要被染菌了
( ?' g/ r$ P- p& g/ J8 D+ m5.你可以在显微镜下看看,细胞浓度大的话,可以换啊,,小的话就算了,别浪费。4 y$ I+ k4 L/ I- H  }, ]
以上仅供参考。
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12楼
发表于 2012-3-21 16:05 |只看该作者
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# s& v( n% d' Q2 X7 J4 d( a. t) I' E/ Y/ ]( s+ j
从你的图片来看,黑色团不是细胞是培养瓶盖子上掉下去的一些黑色朔料!你的细胞碎片很多,可以收集处理!加新的培养液!以后达到密度后半量液传代就行!最后在细胞对数生长期一天一传得到目标量的细胞!
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13楼
发表于 2012-3-21 16:49 |只看该作者
看细胞密度,还可以再长。如果现在半量换液细胞密度可能会比较低,不利于生长。
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14楼
发表于 2012-3-22 01:08 |只看该作者
谢谢各位师兄赐教,小弟获益良多。% R& Q: P7 f" I# R7 e. c

2 _1 K& `; u4 ]* I我想再了解:, n0 h* A% ]  M7 _" u; I. X

' Y$ l, h4 y! M) J1 z9 l  j1.        我知道培养细胞之浓度最好是1x10^6/mL,我是用血球计数器(hemocytometer)去数细胞,但是大家都知道,细胞数量可以很大,请问是否要稀释好几倍先可以数细胞?* f' p0 u5 F8 _8 t# J, t* s' u
1 r6 X2 P/ y+ B2 P
2.        我想问一下,过了几天后,细胞增值速度是多少?:一天一倍?还是几天一倍?
4 {/ d" z/ r/ H% I+ ]6 \( {2 ?, W9 z( B4 I
3.        有关细胞碎片,请问是否用离心换液就可以处理好?为什么会有那么多细胞碎片?可以预防吗?5 o# [  E* q% h
3 |; i7 K+ ?4 j1 K
4.        请问CIK妯胞在浸在PBS环境里,室温,可以存活多久?7 g8 `' a6 \" f+ q+ |7 N
+ u: R- U/ |& d8 Y, `
谢谢大家
4 s/ n4 @" z* [8 |7 H
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小小研究员

15楼
发表于 2012-3-22 22:46 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子( m" i" u% O) ]# a3 c! x% @

" @+ u& p* m% A9 M" e; o8 _建议你发新帖提问

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16楼
发表于 2012-3-24 10:37 |只看该作者
我看着像细胞结团了
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17楼
发表于 2012-3-29 16:48 |只看该作者
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: ~. k. V6 y7 p- t6 g2 ?
% t! \* S+ @4 I9 e1. 用CD3单抗和IL-2刺激是以扩增CIK细胞为主,但是T细胞也会增多。
, x' _$ y% v# x2. 是克隆团,长的特别大的时候要吹打一下,防止里面细胞生长的不好。
" A% J1 C9 N3 y/ c3. 实验证明不需要- V2 I  A! w8 W& ]* W
4. 一般是3天直接补液进去,关键还是看颜色是否变黄,密度是否大。
! o6 a9 o: D/ t4 L0 g
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18楼
发表于 2012-8-20 11:12 |只看该作者
黑色的团块是淋巴细胞增殖的团块的,并不是所谓的什么掉下去的塑料,这是好现象,团块都上浮的时候可以吹散,让DC作用到更多的淋巴细胞,长成CIK。
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19楼
发表于 2012-8-20 12:48 |只看该作者
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* c# I2 n2 A3 G4 E+ s$ ~7 H; V# C% C, _4 }0 d5 ^4 U0 W' P
1. 我们是用的血液分析仪计数的,用计数板的话我觉得应该稀释后再计数。
2 ]0 w% @$ y1 B' O6 k8 J4 F5 z2. 我们养的CIK是两天翻一倍。! D) \' `/ s4 T
3. 细胞碎片的存在是正常现象,只是操作好的话会少些。在换液时我们进行对比过,离心会对细胞造成损伤,从而增加细胞碎片的量。因此换液时不再离心。
9 ^7 g; o  C1 o* s# x# D& Z4. 这个问题我也不知道,没做过,期待高人指点。
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20楼
发表于 2012-8-22 09:53 |只看该作者
1.关于数目的增加,所有的单核细胞都会增殖200-300倍,2 h. w& ^  C1 m
2.图中的黑色球状无为细胞碎片的聚集物,离心换液后会消失的。你上面的那张图我自己觉的应啊做个半量离心换液最好。! j! h8 |, x! s% \0 a( O0 Y& Q
3.显微镜下观察细胞的生长状态,密度,培养基中细胞碎片的多少来决定是否需要换液、传代。; l' U7 s8 O- N3 V# j
4.我建议每4-5天半量换液一次(除非细胞非常的少,但也需要补充因子。)。也需要补充因子。
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