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楼主: 冠忠
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CIK 细胞图片   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-3-21 10:56 |只看该作者
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" O" W  Z. z  |' V# {, C* L3 t
$ R: b2 C8 g: r6 |1.细胞数量都会增加,但CIK细胞数量所占比例也会增加,具体增加多少需要做流式检测。
. `/ e+ z; w, k$ R, n+ [2.可能是一些细胞团吧,能弄散最好弄散,一般好像补液或换液后会自动分散开。% l7 P  X8 H, b& i. O' ^! S: ^; v
3.我看的文献上有说加IL-2的,你可以试验一下加不加有区别没。2 Q  G5 O! B- }
4.这个当然可以,不过最好不要被染菌了1 q( e/ z% o& k
5.你可以在显微镜下看看,细胞浓度大的话,可以换啊,,小的话就算了,别浪费。% _" O1 E9 z/ o( }) T6 q
以上仅供参考。
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12楼
发表于 2012-3-21 16:05 |只看该作者
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" y5 p" D3 D2 c, d. I4 Y0 x* s& O$ B3 w/ N4 y
从你的图片来看,黑色团不是细胞是培养瓶盖子上掉下去的一些黑色朔料!你的细胞碎片很多,可以收集处理!加新的培养液!以后达到密度后半量液传代就行!最后在细胞对数生长期一天一传得到目标量的细胞!
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13楼
发表于 2012-3-21 16:49 |只看该作者
看细胞密度,还可以再长。如果现在半量换液细胞密度可能会比较低,不利于生长。
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14楼
发表于 2012-3-22 01:08 |只看该作者
谢谢各位师兄赐教,小弟获益良多。. A. u  Q8 i. h0 c' ?

! {7 L- |% I+ C. z. {' `& O1 Y我想再了解:) R7 i; C3 b0 h5 T9 p1 _
/ v+ Y+ M$ D4 l, H: v
1.        我知道培养细胞之浓度最好是1x10^6/mL,我是用血球计数器(hemocytometer)去数细胞,但是大家都知道,细胞数量可以很大,请问是否要稀释好几倍先可以数细胞?
( A' a" R( q9 |' o" n6 e. D4 B/ C4 {$ J: l' T& ]
2.        我想问一下,过了几天后,细胞增值速度是多少?:一天一倍?还是几天一倍?& \6 F% s! d+ s, Y- Y
! E2 r; E7 q3 |/ q2 I$ n
3.        有关细胞碎片,请问是否用离心换液就可以处理好?为什么会有那么多细胞碎片?可以预防吗?% S; w6 }+ k  d5 c7 |

. l1 R# d( O8 ~; t- L4.        请问CIK妯胞在浸在PBS环境里,室温,可以存活多久?
0 y6 N# r& p- _+ y. Y. i
) i8 v% C. F, ~, W. _谢谢大家
; E( J/ M; l* {
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小小研究员

15楼
发表于 2012-3-22 22:46 |只看该作者
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$ V2 Q& b) e' z* J( E/ o' K0 b
# R% L: }; r' g/ N建议你发新帖提问

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16楼
发表于 2012-3-24 10:37 |只看该作者
我看着像细胞结团了
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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

17楼
发表于 2012-3-29 16:48 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子  v; n9 H4 E3 i0 j

# ]7 I! c) |. w* b! g1. 用CD3单抗和IL-2刺激是以扩增CIK细胞为主,但是T细胞也会增多。4 W# }) U$ N4 Q, ~/ k
2. 是克隆团,长的特别大的时候要吹打一下,防止里面细胞生长的不好。: C; ?/ J  H; U( l" H' n! l
3. 实验证明不需要+ @. \* q- ?; f8 a; R4 D
4. 一般是3天直接补液进去,关键还是看颜色是否变黄,密度是否大。1 w7 m1 s- g! w4 C
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18楼
发表于 2012-8-20 11:12 |只看该作者
黑色的团块是淋巴细胞增殖的团块的,并不是所谓的什么掉下去的塑料,这是好现象,团块都上浮的时候可以吹散,让DC作用到更多的淋巴细胞,长成CIK。
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19楼
发表于 2012-8-20 12:48 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子4 z6 q3 f: v' G  \) Q& E/ T, z8 a7 T
  q+ B) ?. ]* o4 e! P
1. 我们是用的血液分析仪计数的,用计数板的话我觉得应该稀释后再计数。
: v2 y8 R2 J6 W. D/ w2. 我们养的CIK是两天翻一倍。
6 K( }1 K/ [: ~8 Z3. 细胞碎片的存在是正常现象,只是操作好的话会少些。在换液时我们进行对比过,离心会对细胞造成损伤,从而增加细胞碎片的量。因此换液时不再离心。% O* n  B; m  c7 q
4. 这个问题我也不知道,没做过,期待高人指点。
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20楼
发表于 2012-8-22 09:53 |只看该作者
1.关于数目的增加,所有的单核细胞都会增殖200-300倍,1 }$ ?  o2 k; E
2.图中的黑色球状无为细胞碎片的聚集物,离心换液后会消失的。你上面的那张图我自己觉的应啊做个半量离心换液最好。# M+ ?$ L% `# Z2 c7 O$ M
3.显微镜下观察细胞的生长状态,密度,培养基中细胞碎片的多少来决定是否需要换液、传代。$ O# e! l  k9 ^. Y4 f
4.我建议每4-5天半量换液一次(除非细胞非常的少,但也需要补充因子。)。也需要补充因子。
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