求助：端粒酶活性测定原理

dashexi97

求助各位，端粒酶活性测定的时候原理没怎么看懂。端粒酶的活性不是应该是延长端粒吗？在进行端粒酶活性测定的时候，为什么体现的是产物含量的高低，而不是产物长度的差异？

fengqingrusi

你用的方法是不是公司的试剂盒？ 应该有说明书的。端粒酶活性检测的方法是通过体外反应体系让端粒酶扩增端粒，进而通过PCR 把端粒酶的反应产物扩增，通过跑胶（SDS-PSGE 非变性胶，一般是8%），染色就能 得到结果。我们看到的梯度条带是端粒酶扩增之后产物的进一步扩增，由于是6bp 梯度的扩增，所以能够明显的观察到6bp 差别的ladder 条带。 想像一下，端粒酶的活性越强，其扩增的条带越多（相同大小的片段），相对应的PCR产物就越多，染色之后也就越亮。这就是为什么区分的是条带的亮度而不是条带大小的原因。