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干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 生殖干细胞专区 › 今天丝裂霉素处理MEF出现了问题，谁能告诉我啊
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楼主: chenchunlei
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今天丝裂霉素处理MEF出现了问题，谁能告诉我啊   [复制链接]

frankieisme

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11楼
发表于 2012-5-1 22:27 |只看该作者
本帖最后由 frankieisme 于 2012-5-1 22:28 编辑
" _2 P# _+ R! A# O2 h# O# N$ q% O9 i- C1 E8 M9 e9 V
PBS洗3次,加胰酶消化,镜下观察大细胞间隙出现,细胞稍稍变圆就终止消化,计数种板.为什么不按标准的protocol做,一般情况下还是不需要随意更改protocol.
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zhusealin

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金话筒 优秀会员

12楼
发表于 2012-5-2 07:28 |只看该作者
我们也是处理完洗5遍，细胞也挺正常的。主要应该还是消化的问题
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huangcong1988

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13楼
发表于 2012-5-2 08:30 |只看该作者
回复 chenchunlei 的帖子
/ r! p$ F3 `2 \+ P$ K# a. `+ J! e* [& c% H
1.5ml
( K$ X# F* g/ H+ w6 B# C胰酶？1.5ml是不是多了点？个人觉得你量的三分之一就够了，胰酶哪有用那么多的啊？
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huangcong1988

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优秀会员 金话筒

14楼
发表于 2012-5-2 08:31 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我试过用洗两次，就洗两次，效果也行，不过洗5次可能还是多了点
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receiver1

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金话筒 优秀会员

15楼
发表于 2012-5-2 08:48 |只看该作者
MMC处理的时间是合适的，PBS洗几遍都没多大问题。问题肯定出在你的胰酶消化这一步上！
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myrudy

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16楼
发表于 2012-5-2 09:01 |只看该作者
回复 momocy 的帖子
/ {" \) C$ |; W' ]- P# d  s  f, F) `1 j( M! ?) N6 W% `9 w
洗一遍的话，丝裂霉素的残留量会较多，对细胞伤害较大。
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YYQ6301

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17楼
发表于 2012-5-2 09:04 |只看该作者
丝裂霉素的浓度没有弄错吧？应该是消化过度了
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shangchunhua

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18楼
发表于 2012-5-2 09:54 |只看该作者
回复 chenchunlei 的帖子
' u6 t; `! _6 m# s2 `8 f
% ]8 x% @4 l+ Z" l: fPBS是预热的吗？
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chenchunlei

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19楼
发表于 2012-5-2 21:39 |只看该作者
操作版本怎么这么多啊
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前途似锦

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20楼
发表于 2012-5-3 08:29 |只看该作者
回复 抹了个茶 的帖子9 d# `# E* u: p

1 Y# V$ t# |  q. L! e这。。。。。。。。不要误导小朋友啊，呵呵
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