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新手上路

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楼主

发表于 2012-5-7 09:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我做的猪脂肪干细胞，步骤都是文献中报道的，胶原酶1消化1h，过筛，接种量是10的5次方个细胞每平方厘米，接种到25平方厘米的培养瓶里，24h首次换液，但是每次都是换液后贴壁的细胞非常的少，长到第七天还长不到50%。培养基就是DMEM+20%FBS+双抗（10%FBS也用过）。求教给位高手，怎么提高贴壁的量啊，或者加快细胞的生长速度，总之求教如何解决这个问题。

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pipi168

新手上路

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沙发

发表于 2012-5-7 10:14 |只看该作者

加点vitc试试

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cochongg

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藤椅

发表于 2012-5-7 11:51 |只看该作者

明胶包被培养皿，可以说是人为的帮助细胞贴壁，因为有些培养皿虽然是供培养贴壁细胞用，但是生产工艺不好，或者你用的是便宜货，那么这样是十分影响细胞贴壁的。$ R; Y6 v' x( c2 L8 [" _. x
你所提及的血清浓度等是不会对细胞贴壁造成太大影响。! ^% T4 b- g4 j. f" Z: @" b% A
操作方法：0 f) O/ X- h' f. p2 `* @
配制无菌的浓度为0.1%的明胶，包被培养皿，30min，吸走，晾干，就可以使用了