脐带间充质细胞里有成纤维细胞吗?

shizhu198511

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( t. e9 f2 w/ X# t$ q8 i9 K0 q! h" z5 t0 B
你好，请教一个问题如果血清浓度偏高时，比较适宜成纤维细胞生长，那会不会穿代后他逐渐占优势那

Tim

回复 chrismine 的帖子& H: r* r  w; n1 K
0 S3 L1 l( g$ P( w0 m0 q; P
文献相关的有吗?

Tim

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' ^& T% O7 u* d9 M5 G+ ]- \1 R# E! ~
理论应该是的！成纤维细胞他可以分泌一些因子，诱导间充质细胞！想要分开关键是只能作诱导,诱导也不一定成功！咋样纯化呢!？今天看了些东西感觉可以做个IMB，我的实验条件有限没法做IMB

shizhu198511

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) A4 n5 V" q, P+ i8 p6 {& C! q, V  p9 j3 z2 L
我也一直在查资料关于纯化MSC的问题7 Q, d" F" \4 F7 x
大家说的& D7 Q/ p1 Z: o* ]
1.通过贴壁时间差异
; b1 [& u: g1 s9 k2.消化时间差
& @6 T& R/ M5 Q/ x3 l3.成纤维对低血清浓度耐受性差; F( I: ?- k& u$ v! T
, \4 ^* b& x7 m; c; @; O
但是实际操作起来有难度，时间点真不好把握，我用杭州百事通（名字可能记错了）公司的成品培养基，感觉原代细胞形态就比较一致，觉得他们加有什么抑制因子，至于是什么，可能是商业机密，谁也不会说的！但他们的的确好用！不过就是贵了点！

shizhu198511

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& A" i% q* w: i' l, `2 z- A! \' @( k
' C  B% c8 m' s7 O弱弱地问下，IMB是什么东东？

chrismine

可能是MesenPro培养基更好一些？这个我倒是不太清楚，因为我用的就是DMEM/F12，我没加过太高浓度的FBS最多也就是在15%，太高了没什么用了。一般纯化确实是通过贴壁时间差和消化时间差，感觉足以去除成纤维细胞。其实确实是加各种因子比较好，但是感觉不是盈利性的实验加因子不太划算。正常步骤分离MSC就可以了，只要成纤维细胞量不大不会影响做流式的。

gact

shizhu198511 发表于 2012-5-9 21:59
9 \+ y* v. T, J- v( Q回复 Tim 的帖子
5 A4 M& D. e2 s5 w9 r4 `/ S9 h1 `' f' M. r+ ~( t7 Q. |/ r* F+ Y
弱弱地问下，IMB是什么东东？

! X) W: K* w1 t7 p0 ^同问。。

gact

回复 chrismine 的帖子, [# Y& p0 g: x( z) D

* P" f% n1 ~6 A/ G3 Y5 K分离的MSC在形态上不就是成纤维状么？8 A$ _3 v9 C/ I
非要发生漩涡的形态么？
/ F7 R# U% w" Q3 V: ^! {

Tim

回复 gact 的帖子; x1 @0 n5 a' @) @4 j% g
* P* z" U  ]* ~; E. f
免疫磁珠

Tim

回复 shizhu198511 的帖子+ t  R4 U2 l# i* L0 O
# I* _% s1 _$ x1 g3 R
免疫磁珠（ImpetiCbead，IMB简称磁珠），是近年来发展起来的一项新的免疫学技术，它将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体，以免疫学为基础，渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域，其在免疫检测、细胞分离、生物大分子纯化和分子生物学等方面得到了越来越广泛的应用。原理：运用核-壳的合成方法合成含有四氧化三铁超顺磁性的高分子覆盖物质，利用表面的功能集团进行抗体的偶联，可结合相应的抗原，并且在外界磁场的吸引下可做定向移动，从而达到分离，检测，纯化的目的。