间充质干细胞消化不下来什么情况？ - 间充质干细胞专区干细胞之家



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楼主: caiwwcom	go 间充质干细胞消化不下来什么情况？ [复制链接]

Tim

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金话筒优秀会员

11楼

发表于 2012-5-8 16:37 |只看该作者

回复 caiwwcom 的帖子5 I3 G" f* o! C3 D& g( j! I( v

还有你的恞酶回来分装了吗?咋样保存的!

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Demon_CN

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金话筒优秀会员热心会员小小研究员积极份子

12楼

发表于 2012-5-8 16:56 |只看该作者

首先、你确定你用什么消化，我一般用0.25%的胰酶含有EDTA的
然后、你要确定你的消化条件，胰酶有最适的消化温度等，一般要预热到室温，4度冰箱直接用会影响消化质量
最后、看你的操作，消化时将旧的培养基倒出，加入盐水涮洗两遍，（有培养基会影响消化）( `3 u) H3 i6 M \7 ]. D
最最后，就是你胰酶是否过期了

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caiwwcom

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13楼

发表于 2012-5-8 17:25 |只看该作者

回复 Tim 的帖子

回复大家，刚才借别人的胰酶试了下，就是酶的问题，多谢各位了

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caiwwcom

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14楼

发表于 2012-5-8 17:26 |只看该作者

其实那个酶买了才三个月基本没用过纳闷呢

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chrismine

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15楼

发表于 2012-5-9 13:00 |只看该作者

我记得可以先用胶原酶消化下吧一般可以先消化个1小时，然后再用胰酶消化

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448922239

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小小研究员

16楼

发表于 2012-5-19 22:09 |只看该作者

胰酶的消化程度跟温度，胰酶的浓度，你消化时加的量有关系。有时候细胞长的状态很好也是消化的比较慢的。建议楼主在37度的环境下消化试试看。。。会快很多

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cx4236850

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17楼

发表于 2012-5-28 01:31 |只看该作者

BMSCs养到后面代次比较老了就是很难消化，前面的好消化，你们那气温如何，温度低的话也是消化时间要长点，不过我夏天要好很多，建议你可以加胰酶后放到二氧化碳孵箱中大概半分钟再看看，确实不行用手拍拍接触细胞的壁面，但一定要轻，应该可以下来的，再不就分次消化，多消化几次，把消化下来的细胞先移入含血清培养基再继续原瓶消化，别嫌麻烦，要耐心点，总会好的，祝成功。。。