脐带间充质细胞传代问题

toncv

你好楼主，我也在做相关的实验。你可以分享下你分离培养脐带间充质干细胞的方法吗？  我们用的淋巴细胞分离液分离，STEM CELL的培养基培养，感觉形态没你的好

欣雨1121

消化时间有些长了吧   我的P0代细小形态要比这好些啊

yanwu_1

其实，细胞在高密度下，由于传代导致的分化或表型变化，以及细胞密度过大导致的接触抑制，都可能是消化时间变短，细胞的敏感性增加。

帝国黑骑士

这个消化时间，第一可能是你的心理作用，第二p0代细胞消化的时候和p1代细胞消化是不一样的，p0代细胞少而且纯度不高，所以消化后观察细胞回缩不明显感觉不是很好消化，p1代之后细胞出度高消化观察明显！这和瓶子是没有什么关系的！

maozhuxiwo1

回复 nankou2008 的帖子
. k1 L) w4 @+ G
* ?0 i, O1 ?/ _' I- _' `6 ]有可能是血清的问题吧，请问你们用的是哪家的啊？
9 p1 P, E# M  C: J0 aMSC对血清要求也很高
6 a. r1 u% k& a/ v

上官冰梦

回复 henryjia 的帖子( I* ]+ R, ]% D$ ^5 x1 h. `
/ V& Z; t4 {4 g* g- a6 f
我的也是消化时间特别短基本上加上胰酶就能下来了，但是问题不大，酶对细胞作用时间短反而不会伤害细胞。我想问你一下 你都是让细胞长到这么满才传代吗？7 ~% F# ^' U3 v$ P- |

kingyou117

是的，这个跟代次是有关的，一般P1→P2酶消化时间偏长大概在2分钟左右，到P2→P3时大概就在一分钟一下！应该是跟细胞的活性有关！

445334587

原代细胞长得比较密，细胞之间的间隙太小，用胰酶消化时无法充分接触细胞，故消化时间要长一些，而传代细胞之间的间隙比较大，所以相对好消化一些，还有你的细胞长的太满了，80%就可以传代了。