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间充质干细胞污染的情况   [复制链接]

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发表于 2012-5-23 22:12 |只看该作者
我最近做也是老遇到这样的状况,我都做了四次了,每次都会有小黑点点在动,老师说不是黑胶虫,就是细菌,但是搁了好几天都没变浑浊,细胞倒是慢慢的就死了,求高手指导
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发表于 2012-5-23 22:37 |只看该作者
如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞,这种细胞不分裂,过一阵就死掉了,做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道)。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度。
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发表于 2012-5-26 13:43 |只看该作者
会不会是死细胞呢?要不就是小气泡!
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发表于 2012-6-1 09:35 |只看该作者
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应该是在做布朗运动的非生命体黑胶虫,称之为:硅小体
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发表于 2012-6-2 20:36 |只看该作者
传个图片来看看吧,染菌也不一定在24小时内出现浑浊的,常常遇到有的细菌在细胞接种3、4天之后才出现而且培养基色泽外观和正常没区别,但是镜检下能看到明显的细菌在动。当然你说的这种东西也有可能是培养基添加物里面的杂质什么的,可以多做几项培养看看……
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发表于 2012-6-2 21:25 |只看该作者
这个事情好多养细胞的人的遇到过,也有很多人争论是否染菌。
8 l, x  n/ D+ o1 q. }# \- ^) r' j3 s" w2 ]  a
疑点
  \  k( `  ^* ^1污染物特征:黑色,杆状,布朗运动,有聚集的类似集落) ]# W9 d& W& _  H% m
2,培养基清澈,长时间培养不见扩增。( C0 Q6 ], [% C' x4 w

7 b* G1 Y* l  N8 m3 ~采用对策:1培养基配好后过滤0.22um滤嘴& ^7 z8 @' T# P+ q$ J0 K, `8 U
2换一种好的血清; W7 H% K, I5 v* f3 G% t: h
3争论现在还没有结果
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发表于 2012-6-2 22:12 |只看该作者
革兰氏染色或者取上清涂平板可以排除是否染菌,不是的话估计就是黑胶虫了吧。
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