脐血来源的单个核细胞诱导CIK，细胞增殖缓慢，什么原因呢？

mengnancy

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+ f; y0 A* |6 E+ k/ }5 p6 _# Q非常感谢，细节上我还需要改进。

xinquan15

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4 {# X& d+ [" Y' p" f, M9 ?% {: k0 c  L. [$ g- y; Y
FICOLL离心步骤条件800g可以，但是要室温或者18-20度较好，不要4度6 k* O7 \1 @: d  m/ i8 c/ W$ a

liutianhua

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. ?. q! H" G6 H& t; M6 c单抗用okt3比较好，有个同力海源的也还可以，培养基的话用551表型很不好，单抗的浓度还有IL-2浓度只要在一定范围内就没什么影响。

sciencesky1

回复 大少爷 的帖子! d' D# k% Y' |" v7 ]5 ^. T0 m! |2 w

, M6 O- F2 O" c1 [! G- Q) u# r大少爷，我刚刚接触脐血CIK，我们买的IL-1/IL-2都是peprotech的，单位都是ug，我想问问你，ug和U是怎样换算的，怎样配100 U/mL的IL？十分感谢！

sciencesky1

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  M- b# w. Q5 x% E4 r9 a; L) E9 ]2 j, ?) [, _
不好意思，我还有个疑问，我用分离液分层后，发现红细胞层上面那层也有点红，也就是说ficll层里也有红细胞，你把红细胞层之上的所有液体转移至离心管，那收集的细胞里是不是有许多红细胞呢，你又是怎么处理的呢？问题比较啰嗦，谢谢你！

大少爷

收集的单个核细胞中红细胞多时，降低离心力，洗涤两遍，继续培养，其实影响不是很大，一周左右后当cik细胞增多时，扩瓶，红细胞就不怎么明显了，你放心的培养就是了。
  Q$ x6 @3 c6 }. U8 X* t另外，前几天（第二到第五天）换液时，将细胞悬液离心后，加新培养基重悬细胞，这样可以去除多余的杂质，细胞状态会稍微好点。
* x- j6 X6 ~3 C( t4 ]! B/ o/ E
  {6 _* {0 C, ]8 W7 X1 A5 L' dCIK细胞很好培养，呵呵》》》

sciencesky1

回复 大少爷 的帖子8 @. x" t& n: p* O/ f8 ~8 [9 A% |
% L9 @: H* Y8 Y3 M5 n! Z% x4 N" C
好的，我知道了，十分感谢您的回复！

jiefengbing

在分离单核细胞时应当注意离心机的升速跟降速，并且最好用水平转头，你所说的没有分层，是否有这方面的原因所影响？一般来说，ficoll离心液应该问题不大。在从离心机取离心管的过程中，注意不要晃动。) B, K# l, _* n
另外细胞增殖缓慢，可能跟培养体系有关系.takara的那种培养液培养CIK不太好，要是非要用那种培养液，应当加自体血清或者2%的白蛋白，下次你可以试试看。

wjp130

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, R9 w6 {( i' G! U3 M" Q
请教，最近用脐血养CIK，开始都增殖很好，到8天左右时候，会出现小的絮状物，细胞增殖也变缓慢，甚至停止增殖，不知道是什么原因，我加的是脐血血浆，每天全量补充TL-2，请教了，谢谢

细胞海洋

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