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楼主: shixiangguang
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筛选出来的肿瘤干细胞可以稳定的培养吗?比如冻存、传代等   [复制链接]

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发表于 2012-6-11 22:41 |只看该作者
1.现在用marker 分选的所谓干细胞并不都是干细胞,只能说是富集了干细胞;2.一般分选流式分选出来的所谓干细胞在普通培养基下会进行分对称分化的,进行干细胞实验都要重新分选,用marker 分选看你要分选的细胞数目,如果在10的6次方,需要2个小时左右,加上前面的细胞准备,抗体时间,一共需要4个小时左右。3.你用的什么细胞株?或者原代?,在没有进行鉴定前,是不能说你的分的细胞是干细胞的。如果有已知marker可以分选干细胞就可以不用自己进一步鉴定了,常见的肿瘤干细胞marker,在乳腺癌,胶质瘤,胃癌等有文献报道。
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发表于 2012-6-12 08:56 |只看该作者
我这里有几点想说:1、你分选出来是所谓干细胞将其诱导分化的时候,它们分化成了什么细胞?2、我现在打算先用细胞株看看,以后再做组织和原代,听说原代很难养的活,我做的是肺癌干细胞,3、得到了stem-like细胞后你进行哪些方面的下游实验? 4、我暑假后就研二了,研三要找工作,这工作量似乎很大呀怕是完成不了,求给点建议,,,
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发表于 2012-6-12 09:27 |只看该作者
回复 shixiangguang 的帖子! u8 _. e8 z6 p5 Z% x
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我也是刚起步做肺癌干细胞,不过 不涉及到诱导分化。 我认为 诱导分化以后的细胞是不定的,所以肯能要再次用marker来验证。 一直在做细胞系,没做组织和原代 以前实验室有的人做的原代,做的是博士论文 所以这个可能是需要很多时间吧。我也新手, 多多交流啊
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发表于 2012-6-12 11:25 |只看该作者
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本帖最后由 cocoslee 于 2012-6-12 11:25 编辑
  Y& [3 \- @0 l6 Y- M, n7 t$ h
) X% m: E; g5 a4 f% F有免疫磁珠分选方法,德国美天旎,时间上能快一点。可以用单个核细胞或细胞株分选出具有干细胞表型的细胞,组织的没做过,没法给意见,不好意思,然后上流式测。培养体系共用人间充质干细胞培养体系,分无血清培养体系和带血清培养体系。可以查文献看你培养的干细胞采用哪种培养体系?具体操作时间很长,你得反复摸索实验条件。待解决的问题就是分选的干细胞培养问题,关系到后续的实验。实验做的很郁闷
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发表于 2012-6-13 01:12 |只看该作者
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发表于 2012-6-13 01:12 |只看该作者
回复 cocoslee 的帖子
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发表于 2012-6-13 01:12 |只看该作者
回复 hub12333 的帖子
  w. {7 N% x% T) ?) r/ {% b, b7 n6 K
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发表于 2012-6-13 09:21 |只看该作者
谢谢你们的解答,犹豫呀,看来我还得仔细思量

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发表于 2012-6-19 09:57 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子" ~6 |3 y& ^% V3 B! }
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哦,知道了,谢谢超级版主。辛苦了。(*^__^*)

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发表于 2012-7-23 21:42 |只看该作者
回复 shixiangguang 的帖子# h% f+ V# l) b
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我正在做这方面的,能赐教么?留个QQ
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