gFAP 染色

dianying

gFAP 染色：有没有用 BSA 封闭染色染得漂亮的，大家用PBS还是TBS呀？
9 c0 Z- t" d9 D! U1 @9 L! X9 R. Q谢谢！

Yedan

我做immunostaning全是用10%FBS封闭的……

dianying

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+ S6 K  |8 v5 @( F( J2 v) d- S& h4 B7 H1 f" V
谢谢你！6 r; R8 S. [1 Y1 U* L9 i% h
于我封闭没问题，我只是想知道简单短时的gFAP染色大家常用tbs还是 pbs去洗。

Yedan

( [  U/ z3 [- f6 ?: P: C8 Y* l' P% C: G6 E6 u* s+ R6 o3 k
回复 dianying 的帖子+ `" X* U  i- t9 L
% [/ u+ \8 E9 p" ^+ _
洗的时候不就是用封闭液去洗么，二抗完了染核的时候用PBS就行了

dianying

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+ r4 E% N- {5 [+ s0 a$ v3 }3 ]$ Q
$ y) w( j; Y2 ^+ k# j9 ]7 A& o第一次听说用封闭液去洗 ，可能是我孤陋寡闻了。

dianying

回复 Yedan 的帖子6 u; F3 p: O9 E- H. z+ f; m4 f" b

4 e! N8 D3 c; W8 ~( E2 c看来你的方法比较传统，染核现在大家普遍用Mounting Medium with DAPI， 除非你的核很难出来。

Yedan

回复 dianying 的帖子/ K4 F- z- K8 ^. ^$ g

4 p4 Q2 I1 J3 R  i: e染色不用封闭液去洗，难道用什么？封闭为了防止非特异性产生，你用PBS或者别的什么把BSA/IGG洗掉了，那不是白封闭了？染核……PBS+核染料就够了，没那么复杂，mES/hES都这样

dianying

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$ Z8 o* X$ s' ]# `那你有没有染过gFAP？表达的如何？可以分享吗？

Yedan

你要什么细胞的mES/iPS EB分化的么 hES的我做的neuron的 没GFAP只有nestin

dianying

回复 Yedan 的帖子7 ]. D% E2 q$ z& q
8 f3 p. `' ~! c: {) Q* {
我想看看标神经元和胶质细胞加DAPI三标。