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gFAP 染色 [复制链接]

dianying

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楼主
发表于 2012-6-13 09:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
gFAP 染色：有没有用 BSA 封闭染色染得漂亮的，大家用PBS还是TBS呀？6 _6 q- g) r6 R( R
谢谢！
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Yedan

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沙发
发表于 2012-6-13 10:15 |只看该作者
我做immunostaning全是用10%FBS封闭的……
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dianying

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藤椅
发表于 2012-6-14 08:24 |只看该作者
回复 Yedan 的帖子6 Z% _" S0 J3 b! [; x6 l) n5 Y; B
- ]' M/ I0 l, v3 c4 h; l
谢谢你！0 w; f6 b/ k1 ^
于我封闭没问题，我只是想知道简单短时的gFAP染色大家常用tbs还是 pbs去洗。
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Yedan

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板凳
发表于 2012-6-14 12:01 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
本帖最后由 Yedan 于 2012-6-14 12:02 编辑 ) Z9 p$ o- J5 Z) L: R
  Y5 z. w* K- Z. Z6 ^
回复 dianying 的帖子
% J* M6 c+ f! V/ X
( Z( ~& `/ {/ L0 l( J洗的时候不就是用封闭液去洗么，二抗完了染核的时候用PBS就行了
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dianying

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报纸
发表于 2012-6-15 09:45 |只看该作者
回复 Yedan 的帖子9 u+ q6 j8 f4 R9 k
" [) |2 I" ?4 ]
第一次听说用封闭液去洗 ，可能是我孤陋寡闻了。
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dianying

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地板
发表于 2012-6-15 09:49 |只看该作者
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0 ~; g( i, Z4 N( A1 c- k# D8 R! G! d( `( V" d
看来你的方法比较传统，染核现在大家普遍用Mounting Medium with DAPI， 除非你的核很难出来。
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Yedan

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7楼
发表于 2012-6-15 13:09 |只看该作者
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; ^* G/ q' Q8 _: ?
( I5 X! \2 F6 z8 s0 u! V+ m染色不用封闭液去洗，难道用什么？封闭为了防止非特异性产生，你用PBS或者别的什么把BSA/IGG洗掉了，那不是白封闭了？染核……PBS+核染料就够了，没那么复杂，mES/hES都这样
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dianying

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8楼
发表于 2012-6-16 12:25 |只看该作者
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: q, R, Y1 A6 n( w- W
5 l! J/ i% T2 W" H( R那你有没有染过gFAP？表达的如何？可以分享吗？
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Yedan

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9楼
发表于 2012-6-16 13:47 |只看该作者
你要什么细胞的mES/iPS EB分化的么 hES的我做的neuron的 没GFAP只有nestin
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dianying

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10楼
发表于 2012-6-17 02:59 |只看该作者
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; _! p7 c$ l4 m  ?0 F( {( _1 I/ x% M( o% e
我想看看标神经元和胶质细胞加DAPI三标。
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