细胞培养时很多黑点，像碎片一样的东西，怎么解决

sijicc

我们使用无血清培养细胞的时候也出现了小黑点这种问题) f5 d+ _7 G7 t) x0 b, b3 k

$ U& s) T4 f  v- l: A我有几点看法和你分享
$ G7 {" e  z, p/ q' `  C; K1 不是污染，我们做了血培养，支原体，内毒素等多项检测均合格$ D; e. X" f3 L3 f9 J! J1 N& ]
2 细胞形态不好的时候才会出现小黑点这种状况，在细胞活力和形态都很好的时候则无
  I& \9 \4 c. x

jiojoo

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8 N% Z% f+ n/ O8 W: g& F
1 v% S9 M4 C% Q$ z2 I旁边那些亮晶晶的是正在分裂的细胞

jiojoo

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# I4 \+ K" A4 ], }/ I' @
: ^/ {0 s& B8 k: }) Y0 {不是培养基里的，培养基很干净

jiojoo

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7 ^) Z8 d8 e! D* v8 _6 x8 E- e9 w
# \, \- ^6 q5 \& x* B; ?5 h谢谢
& s3 q9 ?4 t7 P& i- B* `那就是说，细胞活力出现了问题？
9 {3 J2 _. x. V" H+ N血清会不会有问题？

loyal

细胞生长速度如何？如果比正常慢，检测一下是否有支原体污染

jiojoo

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7 s& s- {% ]; s
6 p! o3 T4 m; w0 N请问有没有比较简单便捷的支原体检测方法？

pipi168

细胞碎片，很明显，你才学培养细胞吧，养细胞和种菜一样，要时间长才有经验

loyal

回复 jiojoo 的帖子7 J8 s# ^9 Q% y! F
1 h6 I, Q& H1 `9 G( Q
可以买个碧云天的支原体检测试剂盒或者貌似也可以通过PCR检测吧，你上网搜搜

xbs530515

即便不是污染的话，细胞应该也长不起来了，状态实在太差。有没有细胞密度大一点的照片？不过应该不是血清灭活的问题，一般情况下的细胞培养不需要进行热灭活的。可以考虑取上清来继续培养，看黑点会不会增殖，如要增殖的话，肯定就是污染，注意培养液里面要没有双抗才行。& v, V* e- O8 y) b: J: E* ]
还有细胞的话，可以考虑将接种密度加大一点试试看，细胞状态有无好转

jiojoo

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5 ^: M9 d# N& s/ U7 s
, E7 S- B' S6 a9 G. k! e2 w/ I& G请问为什么会有这么多细胞碎片？/ V) h" l7 L, x& Z, r9 x9 p* C8 E7 C
细胞都死了？
9 @) d, I! r) m! H; p+ q刚换过液的培养瓶，很快（2h）又会有死细胞和这些碎片了