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楼主: jiojoo
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[讨论] 细胞培养时很多黑点,像碎片一样的东西,怎么解决   [复制链接]

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发表于 2012-6-22 12:31 |只看该作者
我们使用无血清培养细胞的时候也出现了小黑点这种问题
5 y+ S5 ~+ [+ D( s
4 V  k( U" W% }( ?! D* Y9 l4 T我有几点看法和你分享1 B. I; d9 [4 t; T5 E, p' t
1 不是污染,我们做了血培养,支原体,内毒素等多项检测均合格2 g5 r0 M& v: k5 n
2 细胞形态不好的时候才会出现小黑点这种状况,在细胞活力和形态都很好的时候则无
1 S) @& E5 n* y+ {' G0 n9 ^
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发表于 2012-6-22 13:01 |只看该作者
回复 紫花地丁 的帖子  B, L9 ?% A" D* E) S' E8 T

, [2 d1 g6 J0 ?" d旁边那些亮晶晶的是正在分裂的细胞

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发表于 2012-6-22 13:02 |只看该作者
回复 大少爷 的帖子0 V* f7 h  F1 t; O$ X* g- P5 m

  P: ]) c7 z. ]  U8 ~; `不是培养基里的,培养基很干净

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发表于 2012-6-22 13:03 |只看该作者
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回复 sijicc 的帖子
. Q# j5 s& C* G4 |, @: a/ M/ R+ J1 W
谢谢
: R* P9 v  S9 l+ P那就是说,细胞活力出现了问题?
6 l, t7 b* b# u1 E血清会不会有问题?

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发表于 2012-6-22 14:30 |只看该作者
细胞生长速度如何?如果比正常慢,检测一下是否有支原体污染
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发表于 2012-6-22 16:41 |只看该作者
回复 loyal 的帖子
, b  f, I! p* z0 Y! C7 V$ d6 a% ~! ^  b
请问有没有比较简单便捷的支原体检测方法?

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发表于 2012-6-22 22:21 |只看该作者
细胞碎片,很明显,你才学培养细胞吧,养细胞和种菜一样,要时间长才有经验
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发表于 2012-6-23 09:42 |只看该作者
回复 jiojoo 的帖子! r! F" e$ q9 Y6 n2 O' n9 j! r, x
- W7 d# G5 o5 i, @
可以买个碧云天的支原体检测试剂盒或者貌似也可以通过PCR检测吧,你上网搜搜

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金话筒 优秀会员 小小研究员 热心会员 帅哥研究员

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发表于 2012-6-23 11:46 |只看该作者
即便不是污染的话,细胞应该也长不起来了,状态实在太差。有没有细胞密度大一点的照片?不过应该不是血清灭活的问题,一般情况下的细胞培养不需要进行热灭活的。可以考虑取上清来继续培养,看黑点会不会增殖,如要增殖的话,肯定就是污染,注意培养液里面要没有双抗才行。+ ?+ e* M) Z# ]: w0 ^: t' R
还有细胞的话,可以考虑将接种密度加大一点试试看,细胞状态有无好转
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发表于 2012-6-23 12:49 |只看该作者
回复 pipi168 的帖子  s- c0 `) s( G: F: X
2 I7 a" Y- H* ~" a! T1 U
请问为什么会有这么多细胞碎片?7 G/ {  u, z6 {0 ]
细胞都死了?
0 E9 D- x& A7 x+ d% E刚换过液的培养瓶,很快(2h)又会有死细胞和这些碎片了
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