细胞培养时很多黑点，像碎片一样的东西，怎么解决

sijicc

我们使用无血清培养细胞的时候也出现了小黑点这种问题
9 ^3 G3 _4 S" ?' `& Q1 R( @! a5 v) Z2 t% \2 t' q& k
我有几点看法和你分享
5 @  Q$ h" `9 O7 ?/ M1 不是污染，我们做了血培养，支原体，内毒素等多项检测均合格
& W! W7 p" b: c% l) l2 细胞形态不好的时候才会出现小黑点这种状况，在细胞活力和形态都很好的时候则无
! Z* P6 e4 O/ ^0 t' n: _

jiojoo

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# |  f' B* T% _$ _' _) O' Z' B) |+ y1 b0 D
旁边那些亮晶晶的是正在分裂的细胞

jiojoo

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! q7 P  {9 Q7 R
0 F! L" y! L! r) x4 G' C不是培养基里的，培养基很干净

jiojoo

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+ r0 I6 Z& S: X
5 |' @" N9 Q6 ^+ h/ n# g( ?谢谢
/ D- J' s: N6 k  _: N' y" X2 k' w. }那就是说，细胞活力出现了问题？
3 [, U: g, e- ^! ]% n; i血清会不会有问题？

loyal

细胞生长速度如何？如果比正常慢，检测一下是否有支原体污染

jiojoo

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" \( U% K8 w3 v+ f1 A  L8 M$ A$ g+ z, P  Z. x# J% U9 Q/ v( f- w
请问有没有比较简单便捷的支原体检测方法？

pipi168

细胞碎片，很明显，你才学培养细胞吧，养细胞和种菜一样，要时间长才有经验

loyal

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) ~1 k% G9 c/ m4 l; a& e% K
  a6 N& c2 X3 k" k6 n( e  Z可以买个碧云天的支原体检测试剂盒或者貌似也可以通过PCR检测吧，你上网搜搜

xbs530515

即便不是污染的话，细胞应该也长不起来了，状态实在太差。有没有细胞密度大一点的照片？不过应该不是血清灭活的问题，一般情况下的细胞培养不需要进行热灭活的。可以考虑取上清来继续培养，看黑点会不会增殖，如要增殖的话，肯定就是污染，注意培养液里面要没有双抗才行。
( v- e% C$ J3 }( A还有细胞的话，可以考虑将接种密度加大一点试试看，细胞状态有无好转

jiojoo

回复 pipi168 的帖子* S- E1 C, p# j, ^. K

* B5 q' T7 u1 G  U请问为什么会有这么多细胞碎片？
6 I; y) L9 |  T1 I7 h( p* @细胞都死了？
& ]$ g! ^4 `$ ^3 j9 o) f刚换过液的培养瓶，很快（2h）又会有死细胞和这些碎片了