细胞培养时很多黑点，像碎片一样的东西，怎么解决

sijicc

我们使用无血清培养细胞的时候也出现了小黑点这种问题
! Y$ b; B' n; B3 c0 P2 G" t6 g+ q$ F' F; @1 r" v# ]
我有几点看法和你分享# l& i% T! [$ M; C8 ^. x
1 不是污染，我们做了血培养，支原体，内毒素等多项检测均合格+ |3 l3 d# w' y, C
2 细胞形态不好的时候才会出现小黑点这种状况，在细胞活力和形态都很好的时候则无7 L  B: w) q1 ?9 ~, P1 R, A

jiojoo

回复 紫花地丁 的帖子# p: B) O; Q! `$ ?

- {; y. v* _4 x+ m( x旁边那些亮晶晶的是正在分裂的细胞

jiojoo

回复 大少爷 的帖子) i& `+ \7 H( M( m$ ?

5 a% o8 X9 ~, D不是培养基里的，培养基很干净

jiojoo

回复 sijicc 的帖子
# p% ]  c3 R9 h& q" Z/ O+ r0 v
7 O0 M/ V+ G. D/ H2 l( I: h谢谢$ @9 c. B% F9 Z/ K$ G
那就是说，细胞活力出现了问题？
9 |( X5 v2 J9 [  {( k血清会不会有问题？

loyal

细胞生长速度如何？如果比正常慢，检测一下是否有支原体污染

jiojoo

回复 loyal 的帖子; {2 ~0 H; o6 @6 k' Y! u

+ N* a8 _# Z9 y7 F) s请问有没有比较简单便捷的支原体检测方法？

pipi168

细胞碎片，很明显，你才学培养细胞吧，养细胞和种菜一样，要时间长才有经验

loyal

回复 jiojoo 的帖子2 ]* h8 ~$ J5 c4 Q/ J" N9 Q" c

0 K$ ]/ u+ n3 q1 p可以买个碧云天的支原体检测试剂盒或者貌似也可以通过PCR检测吧，你上网搜搜

xbs530515

即便不是污染的话，细胞应该也长不起来了，状态实在太差。有没有细胞密度大一点的照片？不过应该不是血清灭活的问题，一般情况下的细胞培养不需要进行热灭活的。可以考虑取上清来继续培养，看黑点会不会增殖，如要增殖的话，肯定就是污染，注意培养液里面要没有双抗才行。
( x& u; u" y* I$ f  X6 l还有细胞的话，可以考虑将接种密度加大一点试试看，细胞状态有无好转

jiojoo

回复 pipi168 的帖子8 f4 x& N/ x, f4 q6 r$ Y
0 u7 n- n4 _8 d6 Y. X9 X
请问为什么会有这么多细胞碎片？
% ~6 @: T2 j; ]4 ]细胞都死了？* G9 J: o4 U% p* K6 x/ `4 N
刚换过液的培养瓶，很快（2h）又会有死细胞和这些碎片了