菜鸟的烦恼

余冬冬

回复 hcluo 的帖子8 R- R0 y9 J9 U5 O6 x, P0 i/ D# U
+ b$ I  i/ b2 x7 }; O. t4 Y
感谢你的建议，可是目前还难以具备上述条件，只能走一步算一步啦，谢谢！

hcluo

回复 余冬冬 的帖子. L( ^7 r5 m+ ~* r5 x

; b  j+ m8 H3 Q/ A3 R不用客气，以后有什么问题可以多多交流。

余冬冬

先在这里说声谢谢啊，以后还会有很多问题要请教的！

精神病院小萝卜

精原细胞本来增殖就慢，更何况你是原代，加着GDNF照看不好都能分化掉你不加还想看到克隆？而且养精原细胞怎么能用这么高的血清呢，精原的培养液基本都是血清free的或者1%血清的，血清太高了很快就分化了，另外6~7天小鼠根本不用每三到四个小时就富集一次，只要在过夜后富集一次就好了，之后就要有耐心了，一般第一代要到10天以后才能看到克隆出来，建议培养液里该加的成分都加加齐吧~

余冬冬

回复 精神病院小萝卜 的帖子; R3 e1 U1 e: ^5 H3 ?) L/ W
$ k4 l, o: W( ~
太感谢啦，只是不知道培养液里还应该加哪些东西？

精神病院小萝卜

回复 余冬冬 的帖子
3 u( P9 \9 m& W* H5 s5 d) C- l6 E1 V4 m" }7 ~1 U& }
一般用无血清的培养液，加BSA供应营养，然后抑制分化的因子，GDNF,bFGF,EGF,建议你看一下宾夕法尼亚大学 Brinster实验室的文章，有培养液配方~

余冬冬

回复 精神病院小萝卜 的帖子* i" Y! m, J- z. I" E" A* \
3 @# X3 D0 p- k( q) v+ T
太感谢你了，谢谢！