菜鸟的烦恼

余冬冬

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- O- P  P7 }# d: [3 x' d
# O  o, ^+ {% d感谢你的建议，可是目前还难以具备上述条件，只能走一步算一步啦，谢谢！

hcluo

回复 余冬冬 的帖子# K" Q: I+ H3 d6 a8 ?6 f2 q4 i

+ q  C1 J6 f% N不用客气，以后有什么问题可以多多交流。

余冬冬

先在这里说声谢谢啊，以后还会有很多问题要请教的！

精神病院小萝卜

精原细胞本来增殖就慢，更何况你是原代，加着GDNF照看不好都能分化掉你不加还想看到克隆？而且养精原细胞怎么能用这么高的血清呢，精原的培养液基本都是血清free的或者1%血清的，血清太高了很快就分化了，另外6~7天小鼠根本不用每三到四个小时就富集一次，只要在过夜后富集一次就好了，之后就要有耐心了，一般第一代要到10天以后才能看到克隆出来，建议培养液里该加的成分都加加齐吧~

余冬冬

回复 精神病院小萝卜 的帖子2 h8 {0 K9 v% h7 n

: M- R1 y, n* e9 c太感谢啦，只是不知道培养液里还应该加哪些东西？

精神病院小萝卜

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  y5 l1 c" e4 g! z" m# t; h, g5 Z, r* G  D5 n8 x2 ]
一般用无血清的培养液，加BSA供应营养，然后抑制分化的因子，GDNF,bFGF,EGF,建议你看一下宾夕法尼亚大学 Brinster实验室的文章，有培养液配方~

余冬冬

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3 @* H7 J0 P% r, |% {& {9 D, c+ y
太感谢你了，谢谢！