请教间充质干细胞的培养问题

song58

回复 86964109 的帖子3 h( A8 J, f9 @& T

8 r: N* R! |) X8 R个人感觉1 X8 G  `# V' d6 {. m* W
1、原代得分什么细胞类型，成纤维还好，原代脏器像肝啊、神经啊什么的本身也不好养；+ Q" Y- }* K/ i. |$ G
2、间充质干的话貌似通常培养也超不过10代。" b. P. M; ]2 D4 H6 f8 E$ w
  f2 ~5 D; t) y: j1 F: h2 n
选择合适的培养条件很重要，包括ECM, Medium, GF等等，这得仔细摸索

86964109

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7 m% g/ q9 M* Q* @* j' ]
  O. `1 {: I3 @" e5 r: g1 d多谢指教，我继续摸索下

86964109

回复 jennyshizz 的帖子1 Y& H9 @2 x1 i! i8 G, v- Y
6 A: t1 a8 ?: r! O" ?' j
十分感谢，请问你们的FBS是哪家的呢？谷氨酰胺添加的比例是多少啊？

yedanna

我是用的α-MEM+10%FBS(Gibco),没加任何生长因子，长得很好，也很快。细胞长得慢会不会培养皿的问题呢？我个人比较喜欢用Corning的东西。

86964109

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) O* `0 D& K6 y( ?' s; Y" X6 j1 t" q) D
我们的培养板也是康宁的啊，需要特殊包被的么？Gibco的FBS要求产地吗？我们用的是Hyclone的

jennyshizz

回复 86964109 的帖子# c/ i) B& l' L5 K7 I+ W8 v

' t) m# P# a& Z我们用的是针对间充质干细胞专用的FBS，谷氨酰胺的比例是1%
8 P) t2 D/ J( R2 `

yedanna

回复 86964109 的帖子3 Q* z  ^1 z7 n% D# W! i/ R
9 P. S8 V1 Z/ `) Y3 g  `" ~
不需要包被，血清的产地问题我到没留意过，都是实验室统一订的/ Q/ w" i8 W% L) w9 N' w

86964109

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7 [8 O- Y0 l8 N: G/ c  S2 d) `& _4 ^4 c: y: C% {
哦，我们现在用的是一般的胎牛，可能有这个原因吧，细胞长得不是很快，你们的DMEM是低糖的吗？我现在的权限不允许添加好友，不好意思啦

jennyshizz

回复 86964109 的帖子, d8 W6 V! e- f* {/ v5 R
8 G+ z! D/ @" g1 z$ d7 z
嗯，是低糖的呀，FBS使用之前是需要进行筛选的，这样才能保证干细胞的生长状态哦，没事啦，有什么问题我没有回答及时的，可以Email我，很高兴能够跟大家交流养干细胞的心得

86964109

回复 jennyshizz 的帖子  R% D/ P6 f) u8 V7 C4 P5 \
8 t5 v/ r0 c; M0 u& ^6 H+ r
好的，才开始做，从头建体系，要好好学习啦