干细胞无饲养层培养基

peiyangli

具体方法就是：在10cm的皿中先铺上5ml的明胶（Millipore的就可以），培养箱中过夜，第二天直接将ES细胞接上去就可以了。培养基配方：DMEM,15%ES Cell FBS,100X NEAA,100X L-Glu,1000X 2-ME,1000X LIF  t- m0 @9 j/ m- P

mayiwaiwai

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" c; Q/ `3 k, p3 k% O4 E# J回复 peiyangli 的帖子
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/ E2 {* [# W9 x0 u2 @1 d) E2 B) u有么有细胞浓度的要求呢

mayiwaiwai

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回复 peiyangli 的帖子
& D8 P9 V% w/ S0 J" h; w, e* A6 g
1 X' M4 W+ n2 U. O* Q追问一句，我用R1的细胞系能做无饲养层培养么？看上边说R1的貌似是不好，细胞系来源影响大么，你用10cm的皿不是很费培养基么？要怎么传代呢，

peiyangli

你用的R1啊？我还真没用R1试过。我习惯10cm养细胞，呵呵

peiyangli

另外你养的是R1，那你的培养基配方有点问题，缺东西。具体一会找到发给你。

mayiwaiwai

回复 peiyangli 的帖子! o1 K* _" O, c1 y9 h
0 a8 ~$ G6 d$ Y: l4 C" F! Q
谢谢，等待中，吼吼。。。

frankieisme

回复 mayiwaiwai 的帖子
3 ]; w" A: C' @! X3 N2 M1 t8 E1 |( b$ u+ ], c8 Y  K; v/ t
做过,小鼠iPS 和ES 都做过,在做分化前一周开始无feeder培养,dish时先用0.1% 明胶铺板,还有FBS  的含量是１５％．一周内传达２到３次就可以了，只要细胞克隆长得好看，没有分化就行．在分化的过程我是用ｈａｎｇｉｎｇ　ｄｒｏｐ法得到ＥＢ，　之后就贴壁培养．

peiyangli

以下是我们用的配方：4 Y  n! d: C. ?; s( ?
DMEM 490ml1 n$ P  X3 C6 ]) D' x' r" l
FBS  90ml
  R5 @# U# r. P2-ME  1.1ml
% S# N1 P% B/ H) D! a* JL-Glu  12ml
& n1 ~! t2 _, Q; s$ M# H( uGentamincine  2ml4 C+ r$ K( R6 V, C) A3 C, n
LIF   50ul
* a! P: Y( R( }; ^' N# c( fSodium pyruvate  6ml
! }  ^# G8 I$ g$ O- ~. x$ e希望对你有帮助。

李夏

回复 细胞-77 的帖子) Z8 A( A9 l6 Y9 Y5 M! s
& r6 K) `3 n4 r8 x# U# x
您好，我养的是小鼠胚胎干细胞，无血清培养基 我用的是N2B27+LIF+BMP4，但是感觉没有feeder条件下养的好 ，传个两代就分化了，想请问您有什么更好的培养液吗？" E; P6 T% C# r' U* ^6 n$ B; `
期待您的答复，谢谢！

细胞-77

回复 李夏 的帖子  i2 f3 C# K- R# Y$ n, R

* y. Y% `) V$ f0 q& |- o- o4 ^我们是人的iPS细胞，有公司专门卖无feeder的干细胞培养液。