干细胞冻存疑问

zfgxb

我将培养中的脂肪干细胞放4°C冰箱保存一周，没加什么冻存液，昨天拿出来观察染色，细胞没死，也没分化，跟之前的一样。细胞只是代谢减慢，省却不停的换液。

elvis.yao

细胞冻存复苏后，一般洗细胞的过程是洗去DMSO还是血清，或者是其他的冻存液成分？

细胞海洋

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凤城收藏

lindanmiaoyao 发表于 2013-5-17 11:38   X9 Y9 ~! p, b0 h0 t
我之前看到一篇文献上说，DMSO除了有毒副作用，还有促进向神经细胞，内皮细胞等分化的作用

4 S; r! \; c2 R& f  H
其实间充质干细胞冻存液中DMSO浓度相对于脐血来说是小巫见大巫，一份脐血通常使用量在4~5mL左右，移植时可以不清洗，直接回输，因为洗完DMSO后细胞成团厉害，即使这样的患者，移植后也很少见副作用报道，因为DMSO可以通过呼吸排出。愚见。

wf78365421

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3 n- x7 f& h' F  T; V. j, D1 L
你是染色看活率？. B; O9 B* b3 x. w9 ]
那你有没有重新接种？看脂肪干细胞是否可以重新生长？

wf78365421

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+ g1 W) g6 c( P# ?$ s# f$ y是的。脐血移植都是连DMSO一起回输到人体。只要量不大，就没有问题。

wf78365421

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+ E# d) E, k6 i- _洗去DMSO。因为常温下，DMSO对细胞有毒性。

elvis.yao

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6 h" D0 S: @% B0 S4 f: W感谢您的回答，但是如果冻存液复苏后，盐水稀释直接后直接使用呢？＜10%DMSO毒性很小吧？

elvis.yao

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7 F2 a; O3 c* H% e0 U& r6 D- p2 g  l) V. S. d
那为什么目前很多公司生产的细胞都是在实验室洗去DMSO，然后4℃在8小时内运输？如果直接冻存状态运输然后复苏直接使用不是更方便？

wf78365421

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2 P- l( i& a# e9 @! V  U' y  C/ J
: o, S% `6 u# e" `4 {9 d  w$ {可以冻存状态下运输（干冰或者液氮），然后复苏直接使用。8 w0 Z4 Y' x/ q
除去DMSO可以减少副反应。