干细胞冻存疑问

zfgxb

我将培养中的脂肪干细胞放4°C冰箱保存一周，没加什么冻存液，昨天拿出来观察染色，细胞没死，也没分化，跟之前的一样。细胞只是代谢减慢，省却不停的换液。

elvis.yao

细胞冻存复苏后，一般洗细胞的过程是洗去DMSO还是血清，或者是其他的冻存液成分？

细胞海洋

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凤城收藏

lindanmiaoyao 发表于 2013-5-17 11:38 ; i$ W' P5 p2 U& Y; Z. z1 [
我之前看到一篇文献上说，DMSO除了有毒副作用，还有促进向神经细胞，内皮细胞等分化的作用

; c* E( i8 v4 U3 u) C
其实间充质干细胞冻存液中DMSO浓度相对于脐血来说是小巫见大巫，一份脐血通常使用量在4~5mL左右，移植时可以不清洗，直接回输，因为洗完DMSO后细胞成团厉害，即使这样的患者，移植后也很少见副作用报道，因为DMSO可以通过呼吸排出。愚见。

wf78365421

回复 zfgxb 的帖子) ~5 k' ?! f# w3 v6 ?
4 O/ b9 h) K) l/ p
你是染色看活率？
% U$ a9 _+ r1 }- |; h那你有没有重新接种？看脂肪干细胞是否可以重新生长？

wf78365421

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0 G) `0 M  V; i  d1 F; e0 N! T! i" ~
是的。脐血移植都是连DMSO一起回输到人体。只要量不大，就没有问题。

wf78365421

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! w9 v7 u8 e. m洗去DMSO。因为常温下，DMSO对细胞有毒性。

elvis.yao

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( t& m1 c3 C5 E3 \
5 |* U! f& F) Z感谢您的回答，但是如果冻存液复苏后，盐水稀释直接后直接使用呢？＜10%DMSO毒性很小吧？

elvis.yao

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! S7 p) Q8 u$ o+ P0 o) p) i: O- d5 e( ~+ G( p3 ^6 {6 v, P
那为什么目前很多公司生产的细胞都是在实验室洗去DMSO，然后4℃在8小时内运输？如果直接冻存状态运输然后复苏直接使用不是更方便？

wf78365421

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5 p; X+ y2 ~5 N0 d( e+ q9 z5 q0 \( r$ \( L" ?$ r8 O
可以冻存状态下运输（干冰或者液氮），然后复苏直接使用。! J' V/ H! k5 Z1 H- a( y' M
除去DMSO可以减少副反应。