2i培养基

mayiwaiwai

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1 \7 x! l8 C% c  l- P9 k5 S" n$ U  [- N
冻存ES的时候用了25%的血清和10%的DMSO，可是复苏的细胞就是不长，是谁什么缘故啊
5 |; W, J8 l$ ?5 j* R$ L; G2 T, o0 z

wbj1983

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+ \# U$ H& j5 z4 \5 M7 {0 V
1 q, y$ f$ y9 Y: i只要克隆形态好几天传代不是问题，细胞长的不好的话早一天晚一天传代都长不好！

mayiwaiwai

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4 o3 A4 W; Q8 Z# X
# D1 w6 ^) \* ^; }又复苏了一次，用新配置的培养基，结果长的还好，加了2i的培养基放了差不多一个月，是不是不能用了，之前了解到说L-Glu容易降解，是不是这个缘故呢。

wbj1983

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( R2 h: m9 Z8 z! ~/ F- `9 b6 i: x. h
6 V4 U3 f& P# X9 i# C% K& S有这个可能，如果配好的培养基在4度的话最好不要超过一个月，如果大量配培养基冻存，先用先拿的话最好！

scottist

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) z% `# S3 G9 v  F9 X5 Q$ B) h+ N+ u, q+ i) k# @7 Z
你好，最近尝试无feeder养mESC，老师养不好，看到你发的图很漂亮，想向你请教一下，除了2i，还加什么，浓度多少？谢谢了。

lp0030

mayiwaiwai 发表于 2012-12-20 22:27
; S7 F3 N' _" D/ ?回复 wbj1983 的帖子
, U3 a) g5 Q* K6 ?7 X- r0 l* S& G( [  I
又复苏了一次，用新配置的培养基，结果长的还好，加了2i的培养基放了差不多一个月，是 ...

9 E1 B& V9 d7 ?4 h* X2I无血清培养液，首先细胞贴壁比较差，传代的时候需要小心。培养液中胰岛素等蛋白因子太长时间后也不稳定，可能造成细胞生长变慢，建议1个月内用完。另外，巯基乙醇必须添加，加不加差别是很大的。