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楼主: yuhaoze
go

293T养不好,前辈帮忙来看一下吧!   [复制链接]

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发表于 2012-10-17 13:33 |只看该作者
回复 flowguo 的帖子2 K/ h, ?8 h  S, H, P  m9 S
# f& R$ N; ^* M$ l* J
恩,让我扔了,今天又传了一瓶,有点问题想问问您:
" D9 g/ W5 S7 t. |4 Y7 A/ h. t$ J传完了之后镜检看到都是单个的细胞,可过了一会儿再看就是一团一团的了,这个怎么办?
8 k- o( E% q# r- q# k$ f用不用胰酶消化?一吹就吹下来了
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发表于 2012-10-17 13:57 |只看该作者
细胞间隙之间的死细胞碎片好多,还聚团生长。这样细胞生长的会很慢,而且细胞不会铺开生长,被夹在中的细胞就会慢慢老化死亡。估计你这个应该是支原体污染,建议丢弃这种细胞,做好消毒工作。重新复苏细胞的时候可以加大血清浓度,比如到20%左右,先养两天。
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发表于 2012-10-17 14:13 |只看该作者
多长时间培养基没有浑浊?不是污染的话那死细胞太多了,都是碎片。
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发表于 2012-10-17 14:13 |只看该作者
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293T还是很好养的

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发表于 2012-10-17 14:22 |只看该作者
回复 jihaijie 的帖子3 T; ~- ?& V& l8 X
# r. C2 ]& Q) w% A' c9 p% A
就是啊,但是我怎么养不好呢

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发表于 2012-10-17 14:24 |只看该作者
莫急,细胞不要总动,放上3天或培养基不发黄就不用动
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发表于 2012-10-17 14:26 |只看该作者
回复 jihaijie 的帖子/ A6 y) |' m7 J7 y

8 t, S$ H. w6 ~好。上面有个师姐说的支原体感染,这个概率大吗?需要把试验台彻底消毒一遍吗?
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发表于 2012-10-17 15:24 |只看该作者
消化过了吧,还有就是培养液中杂质太多,全部都换一遍吧
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发表于 2012-10-18 11:50 |只看该作者
293T细胞还是挺好养的,一,密度不要养到太大时消化,这样状态不好;二,胰酶浓度不要太大,或者如果用0.25%胰酶的话,加上胰酶铺匀后要立即吸出,用残存的胰酶完成消化,看到变圆后立即中止。这些黑点如果不是污染就应该是细胞死亡后导致的。
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发表于 2012-10-18 17:40 |只看该作者
这种情况不是污染,但是不是污染,是细胞本身不好了,不能继续用了,建议赶快扔,扔了再买。
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