求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

2 ~% T$ l3 p  @. m9 }$ n% J: H8 e+ O- }, ^: N( Q0 O
     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

jhu132llh

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* \# u5 O" j$ A接种的问题
$ ?5 i+ F# E* a" p" u4 I接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞
3 n8 @( d. w+ [0 v9 F6 }因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

quge_00

' W. P5 ]3 n* n. F: H

4 w# y- C+ X' k3 T9 D回复 Tim 的帖子. e( U' p' ^" m

( Z5 v- P9 t. q8 s5 v+ X9 @1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；$ q, z& a. i, g# @) B9 t! K
2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；" a, n  _6 i( B
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，
, Y: T# Y* L3 z) `; Z" y) @小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间
/ J; b/ \/ Z( e. U0 G* l（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）+ c* |3 w# h. v+ T) D
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

Tim

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方法极好！非常感谢！

小渝

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我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

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这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

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不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了