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楼主: ying
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[请教] 液氮为何会进入冻存管,是否会污染细胞   [复制链接]

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发表于 2013-7-11 12:32 |只看该作者
回复 雁南飞 的帖子
6 j5 }0 f" G: F1 J) z! ^7 n2 e; K  T9 \
好的,十分感谢!我去看看

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发表于 2013-7-11 14:31 |只看该作者
本帖最后由 sdzhzwf 于 2013-7-11 14:40 编辑 3 B2 V+ }! [% D4 Z* D" Y( K9 l
9 y  J. p$ M+ ~8 C- K
我认为投入液氮的时候急速降温导致冻存管内压力过低以至于液氮会进入,但是,在液氮中被污染的风险还是几乎不存在的
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发表于 2013-7-12 09:02 |只看该作者
热胀冷缩是一定会导致没有进过处理的冻存管进入液氮的,但是你可以试试在冻存管外再缠一圈医用胶带,这样就会减少夜宴进入。其实液氮中冻存管热胀冷缩也就是那么几秒钟的时间会产生缝隙,然后立刻就会恢复密封状态的。
9 J% ]# \, A* y0 f2 R* O( ~   祝你实验成功。
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发表于 2013-7-12 09:39 |只看该作者
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热塑膜1 N& e! E" K7 Q
可以选用这种热塑膜,加热软化後用镊子夹紧可达到密封效果,存放在液相或气相液氮中都没问题,不会渗漏。
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发表于 2013-7-12 10:05 |只看该作者
corning外旋的管子比较容易进入液氮,但由于密封性较国产的好,所以进去的液氮出不来,拿出细胞的时候就容易炸裂。内旋的相对好些,不容易炸,可是比外旋的易污染。支原体污染会在液氮罐中传播。好像看一些产品广告中有那种塑料套,可以把冻存管封在里面,做成像香肠一样的东西,可是这个比较占地方,没在实验室见人使用过。
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发表于 2013-7-12 10:46 |只看该作者
回复 ying 的帖子* F$ D+ _; f# Y% f! h! E4 i/ d

/ }( W3 R3 o( _2 h" Q: L管子会热涨冷缩的,液氮会进去的。短期冻存最好用悬挂或-80度冰箱,长期用气相罐。没条件的话可以用冻存管套。
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发表于 2013-7-12 10:56 |只看该作者
冻存管进液氮很正常,冻存管材料在那么低的温度变形不均,就会有空隙,液氮就能进入。至于污染,如果有细胞被支原体污染肯定能够引起其他细胞污染。至于爆炸,那也正常,因为液氮从液态变成气态是,体积比是1:500,所以解冻时要小心。
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发表于 2013-7-15 13:23 |只看该作者
一般都是国产的冻存管,在液氮中容易变形,液氮就会就如管内,建议最好用进口的,质量好一些一般不会出现这种情况。
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发表于 2013-7-15 14:15 |只看该作者
基本上所有的密封在液氮下都会变的很脆弱,冻存管盖子和瓶身材质不一样,所以低温下的形变也不一样,液氮中可以有支原体,冻存是实验室支原体交叉污染的一个主要原因,所以要么将冻存管放在气象保存,或者楼上的方法,还有就是有种特出的管子用来绝对密封冻存管的,可以在网上查下
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发表于 2013-7-15 20:53 |只看该作者
冻存之前一定要拧紧冻存管,不过尽管很用劲的拧紧,液氮是仍有可能见到细胞冻存管中的,你想啊,压力那么大,又是处在那样一个极端环境~进入的量少倒还问题不大,如果进入的液氮量大,复苏细胞时很容易发生冻存管爆炸~至于污染问题嘛,我遇到液氮进入冻存管好多次了,但是污染倒是没有那么多,大多时候的污染还是自己个人操作问题,或者是有脏水进入冻存管,液氮进入带入污染的情况我想应该很小~不过个人建议,如果你的实验经常发生液氮进入冻存管,并且量大,最好找出原因,以防万一不知名原因造成污染
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