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楼主: your1024
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请教克隆的挑取   [复制链接]

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发表于 2012-11-19 10:55 |只看该作者
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回复 your1024 的帖子
3 f' u  y0 q  I& w$ W8 G
7 J2 k3 a- l2 u9 n. x; G7 W就是计算好细胞的数量,然后用培液稀释,分装到96孔板里面6 {2 ?8 p8 x! R  l: k  \! J
保证每个孔板的细胞数量是1个就可以了,
: Q$ P2 j6 x9 d. y# ?8 q5 |( L等细胞长成菌落之后,用抗性去筛选,然后得到的单克隆就是比较好的阳性克隆了
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发表于 2012-11-19 15:44 |只看该作者
回复 yaolinzhang 的帖子
- z7 @' m2 u3 P( K5 A0 p/ M
- o2 q7 P$ @2 }% E$ W了解了,多谢!想让老板专门买个镜子,不愿意,唉

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发表于 2012-11-19 15:51 |只看该作者
回复 eley 的帖子+ n1 M& D! s+ X) V
5 B' |5 @+ K) _1 r
多谢!想想就觉得好繁琐的操作。这种方法是在构建时会用到的吧?正常培养的时候也会这么做么?

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发表于 2012-11-19 16:03 |只看该作者
回复 your1024 的帖子9 R% M. [  T8 ]7 @* f. Z

, v2 M0 J, T2 j+ ~! I) A不客气!其实你也可以在细胞间的相差显微镜下操作,保证无菌就行,另外,需要在培养基里加上抗生素,注意尽量不要接触到培养基。
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发表于 2012-11-19 17:10 |只看该作者
回复 your1024 的帖子" q0 s4 A; A6 F8 r4 k: ?' V: B/ U

, R* V) k8 y7 g: _( h; B5 x+ w* ^# D恩,如果已经晒到好的单克隆,就正常培养就好了
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发表于 2012-11-20 00:16 |只看该作者
回复 your1024 的帖子
8 u7 E; g- F* Z% u. h1 l( b
* E' F5 M5 Q6 L( v5 ^0 {这个,好像不同的显微镜不太一样,我们的一般是用来检卵的,可以把视野调成立体的
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发表于 2012-11-23 12:17 |只看该作者
我们有两种,一种是普通的相差显微镜,另一种是无目镜大屏幕显微镜,都还不错。
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发表于 2012-11-24 08:16 |只看该作者
我一般是用那种倒置式的光差显微镜,在开放空间,旁边点一个酒精灯就可以。
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发表于 2012-11-24 16:36 |只看该作者
回复 your1024 的帖子# \3 X0 Y" [$ A' e6 D$ \
5 e8 t4 p* ~: g$ I% a
我们一般使用的是相差显微镜,直接在无菌细胞间内进行操作,操作前一般会对屋子进行紫外照射,使用的时候会用酒精棉等擦拭显微镜,这样一般不会造成污染。
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发表于 2012-11-24 19:00 |只看该作者
回复 fjnuxp 的帖子# O, G. j+ e- r& N/ h3 ~
& O8 U) I( T) I" b( V( A4 f
好的,谢谢!那你们是在室内操作还是在安全柜里呢?操作前有什么要注意的么?
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