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楼主: caiyu07248
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间充质干细胞形态(原代)   [复制链接]

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发表于 2012-11-21 10:36 |只看该作者
细胞已经老化了

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发表于 2012-11-21 10:42 |只看该作者
是啊,血管抽不干净,是比较容易老化的
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发表于 2012-11-21 11:14 |只看该作者
回复 caiyu07248 的帖子: @- M2 A% I8 |* J

* s+ u! g" t/ \组织块贴壁法就可以多练习一下剥离,两条脐动脉还有一条脐静脉都是挺好识别和去除的。你说消化时细胞没变圆,是不是忘记预热PBS和胰酶了,或者是胰酶放4度久了,胰酶在4度活性会慢慢降解的。
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发表于 2012-11-21 11:17 |只看该作者
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动脉应该没问题,把脐带剪成3cm左右的长度再抽,你抽的时候注意力度缓慢轻柔,应该是可以完全抽掉的,静脉的话,的确用力稍微不当就可能使得静脉中断并回缩到组织内,这就不好找了,这个时候你可以将静脉干脆完全剪开,有镊子剥离静脉,实在不行的话,用刀片将静脉的那块周边组织刮干净。总体是宁愿少取点,也不要让太多的杂细胞混进来。细胞的生长细想起来很奇妙,就说楼主这种情况,按理说,脐带间充质干细胞还是比例上占优势,但就是那些“害群之马”,会很影响细胞的生长。个人的一点想法是,在体外培养的环境中,在营养方面足够的初始阶段,相对来说分化程度更高的血管内皮细胞(也可能有内皮祖细胞),在抢夺资源方面比较为幼稚的间充质干细胞更具优势,就像一个成人相比较十个儿童来说,占有和掠夺资源的能力会更加厉害点,但十个儿童成人后,基本就可以完胜了。所以,无论哪种来源的干细胞,原代培养过程中,细胞的纯度或许比细胞的数量更重要。
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发表于 2012-11-21 11:26 |只看该作者
细胞老化的比较严重啊。接种的时候密度要大一点。
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发表于 2012-11-21 11:32 |只看该作者
回复 jensn 的帖子7 V/ n3 a% P5 R
! s6 g5 X( F- }, U2 K' h
受教了,非常感谢!!下次再做时,多花点时间好好试试。

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发表于 2012-11-21 12:55 |只看该作者
要对孩子样对待细胞。
  Y! [. h5 x# S8 W" O脐带动脉比较好抽,但是静脉我经常或者基本上抽不出来,做出来细胞状态也可以,但是掺有其他细胞。
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发表于 2012-11-21 14:38 |只看该作者
酶消化的细胞是挺难消化的 放在培养箱37度消化4-6分钟会好一点
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发表于 2012-12-3 09:49 |只看该作者
可以给我一些有用的培养脐血间充质细胞相关文献?非常感谢!!!!

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发表于 2012-12-3 12:28 |只看该作者
回复 笨球球开心 的帖子$ q4 B; V9 i) u0 P8 ]( T

1 t6 M: {2 K4 t% m: g不好意思啊,脐血方面的间充质干没有,脐带方面有,需要吗?
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