请大家帮忙看看，拟胚体贴壁后形态？

sunflower636

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7 d! L2 [  @1 O# ^; l/ U6 {$ d1 h+ `" w9 F, x
这个不是你要的心肌细胞吗？我看到你的第一和第二副图旁边就是这种细胞啊？

summer0914

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. h. d- z; T% E4 I/ R5 k. Z* R$ \2 @5 y, l: v
旁边？哪里有心肌样的细胞啊。如果是的话不是应该跳动的嘛？可是到今天还是没有搏动哇。

sunflower636

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# d* W+ K5 @$ @
  ]7 p& D0 M0 Q+ x搏动？？挺有意思的，抱歉我不是做这个方向的，你的第一幅图很像组织块培养法时旁边爬出了些细胞出来。

summer0914

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/ Y+ ?- v7 n; g3 `  l- l( k3 O% V/ r! G/ z
哦哦~ 误会啦。我这个可不是组织块培养法呀，是mESC CGR8系直接传代再分化的，如果分化成心肌细胞会搏动的，不过也谢谢啦，多取经哦嘿嘿。

Jonathan

回复 summer0914 的帖子$ [4 S7 E9 r4 N0 i1 `. f/ o

, B' K3 t# f' K3 n* Q7 D/ D( x: d用自己的方法。还没发出来。可能过几个月可以发出来。现在基本CTNT可以做到80-90%，每个well（六孔板的一个孔）可以拿到1500万CM

zpzp0312

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: ~. g5 C) }  t; S
* D9 v" Q0 a0 Z! U8 F" w跳动发生在铺展开的部分，跳动点不止一个，40倍也可以观察到。5 `5 g, b$ H( E9 U+ ~5 T$ Z3 n
你放心吧，这个实验基本上是做一次就能成功一次。! J3 r: m0 t0 T! c: ^. c
关键还是这句话，细胞状态一定要好，才能形成好的球状EB，才能继续完成后续实验。你这个看着还不错！
- i( ~& j- v% g7 }你也不用着急，你现在贴壁培养的EB只要不死，就多养两天，因为有时跳动不明显，一定要仔细观察（但基本上跳动都是很明显的），并且跳动维持的时间也就是5-7d，刚从培养箱拿出来时跳动的快些。总之仔细观察并且别错过跳动的时间就可以见到了。+ a% s; J- K: g3 s6 _* c
细胞培养时的状态是很重要的！

summer0914

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5 i" v# N* m2 o; z" V! v* l( l9 X( U$ o6 r9 J* i" W- a
嗯嗯，谢谢你帮忙啦，希望你的实验也顺利哦~' R) T2 c7 y* d0 ^; e
现在已经贴壁第9天了，有一些EB中心颜色比较深的地方脱落了，然后变成中空的了，这是不是说明拟胚体就开始凋亡啦？

summer0914

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, v% O7 M4 t+ `9 \8 S+ U+ H' E
) ^4 U/ [5 ^9 i# x哦哦~ 谢谢啦，希望你的实验也顺利哦~

zpzp0312

回复 summer0914 的帖子( ?1 t  T. g2 f1 J
" U; s" R" A; A% q' ~) C" C& d3 O" i8 x
中间部分一般会发生死亡，但是否为凋亡我不清楚。毕竟没做过凋亡检测。

ligangtiancai

回复 Jonathan 的帖子% T/ r) _) l2 C. Z3 D: Y3 r" e1 \

! n! _) J* T7 `6 ocTnT阳性率有80-90%，真的好高啊，可以问一下你用的是什么方法和培养基的配方么？谢谢？