液氮罐内冻存细胞是否会污染？

crazytime

液氮中可以存在少量支原体，而且冻存管在低温下，密封是很差的，所以在液相下冻存的细胞有可能感染支原体，但是细菌污染的话，应该是冻存之前就污染了

abgg

回复 歪歪 的帖子, [: l1 H# Q7 K, s2 E) m5 P3 c4 g! A
$ u) H$ r% Z* O) v1 L
权威！

三月桂花香

冻存前除了做细胞表面抗原分析外，都会进行无菌检测，复苏时会进行支原体检测，这种情况要么是冻存前就已经污染，要么就是在复苏过程中被污染。

iytbxxg

DMSO都不用过滤吧，我之前从来没听说过DMSO要过滤的，能在DMSO中生存的生物我目前还没有听说过，一般复苏后污染的可能性有一冻存前发生污染，不单单是细胞来源，冻存管都有可能，很多冻存管用的时候管是没拧紧的。二是保存环境造成污染，我在学校时候再细菌扔到负80，拿出后还是有活的，哪么细菌在液氮里还是有能活下来的。三是复苏过程造成污染。所以你还是从这几方面检一下是哪里出问题了

huangcong1988

回复 rongcuizhen2005 的帖子
% t- w* k# k( {8 r3 l4 A( i: n) T. f. h& B% K$ f
请问，你冻存后复苏情况怎么样？

deshenglll

有一定的可能性，液氮会进入到冻存管内的。有条件弄个气相罐。没条件的可以找些冷冻套。将冻存管封起来。

yunshi503

也是存在污染的可能，特别是混装的液氮容器。建议细胞单独贮存，尽量无菌环境操作。

BDFCM

你可以做个试验：
* a4 H& r# D9 x( V把冻存管只加冻存液，不加细胞，然后和细胞一起冻到你的液氮罐里，然后一起取出复苏。细胞就按常规程序，冻存液就取几微升，接种到新鲜培液中，看看是否有污染。

uslzhang

一定会被污染，因为冷冻时冻存管都发生变形，盖子是无法真正盖严的，泄露液氮进去就不可避免了，液氮成为了交叉污染的媒介，这些其实很容易想象得到。

Hellfire

个人认为，产生这种污染的情况可能有以下三个原因：
1 L1 T7 Q" i, B! N$ E8 Z1、液氮罐中可能有其他标本感染，然后液氮罐内的其他样本不同程度的被污染，有些细菌、支原体什么的低温是不足以杀死它们的。
. N1 x( N+ b) A2、复苏细胞使用的水浴箱的水可能污染了，最好检查下，彻底消毒。
2 b' D) z4 t; ]! n9 g4 O3、细菌培养的假阳性。