病毒感染细胞问题

小时候就很酷

细胞状态和病毒活性也很重要，你转染时时间不能过长也不能太短，最好是傍晚转染，然后早晨收细胞。一定要把握好时机。

huangcong1988

回复 yueweilei 的帖子, q4 i& E9 B! D! `6 u- T5 i. h
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我知道，那你包完毒以后，加入到感染细胞中，总有一定体积吧？

yueweilei

回复 huangcong1988 的帖子! B% f7 I4 h& s. h+ ^

0 J1 p! Y) ]8 o( c2ml/孔

huangcong1988

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1 P" k/ T0 V3 r  ~" K
& x% N: Y! q! B" @: M1 u直接用10cm dish包毒，然后病毒液不浓缩，收集的病毒液直接感染MEF，6孔板，每个孔2ml病毒上清是吧？这样细胞不会死亡吗？应该会大量死亡吧？还有一个问题，加了polybrene没？

spongezhao

回复 varing 的帖子8 g  Q+ I# i% `
& t8 c& |' Q1 W. U( R# w/ |2 R. j
请问是MEF铺稀点吗？如果是的话密度铺多少呢？感染多次会不会造成细胞的大量死亡呢？

yueweilei

回复 huangcong1988 的帖子6 H, b! T1 u4 @2 |' S' A

5 Z+ V8 I& H  U3 q' s, C加了。细胞没死。12孔板！total 2ml。其它的你自己摸下条件吧！

细胞海洋

回复 spongezhao 的帖子
4 f7 c( }/ o/ O1 t
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varing

回复 spongezhao 的帖子) _& r- y1 A+ x+ ^

9 m5 t1 v4 J" X/ B: D是的 MEF可以铺稀少点 因为多次感染过程中细胞还会长一些的 多次感染会有细胞死亡 我发现有的地方是成片死亡 就一块地方 细胞裂解一样 好的地方和死亡的地方 界限分明

huangcong1988

回复 yueweilei 的帖子: o9 c; D) }/ e! B' S
0 s. }8 g$ N% l
您是二十几天以后才出现colony是吧？那之前细胞形态那些有没有一些变化呢？就是细胞出现聚集的情况？我发现孔板周围的细胞，可能是feeder已经出现脱落了，怎么办呢？

yueweilei

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不是感染成纤维细胞吗？怎么会有feeder啊？我的是加病毒没几天，细胞形态就发生变化了。但是成为克隆要十几天！