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楼主: xuanxuan2121
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[请教] 接种密度的问题   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 小小研究员 优秀会员

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发表于 2014-2-13 09:02 |只看该作者
关键是看你养的什么细胞,楼上说的对,ES没法计数,是看细胞克隆团的密度来确定传几个板,传代太稀细胞张不动,传代太密容易接触抑制,影响下一代生长;像间充质干细胞传代时就需要计数!
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发表于 2014-2-13 13:31 |只看该作者
这个肯定要计数(计数都有误差,何况没有计数),计数后才能掌握好接种的密度,这样后面的传代和冻存才好掌握,要不然细胞不是老化就是细胞数不够。
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发表于 2014-2-13 21:07 |只看该作者
这些都是经验值,要根据具体需要的细胞量来决定吧。还有具体是何种干细胞也没有说清楚呀,每种细胞具体增殖周期应该都不一样的吧。如果是养ips基本是1:3,两天就传一次代了。
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发表于 2014-2-15 10:43 |只看该作者
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发表于 2014-2-15 10:45 |只看该作者
408_G_1369345147384.jpg 我们用的就是这种,还好误差不大
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发表于 2014-2-15 14:15 |只看该作者
回复 xuanxuan2121 的帖子5 ~' m) }- z5 ?1 X1 \
: w. }- C: a2 S5 a
1ml培养液4000个细胞。
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发表于 2014-2-15 18:00 |只看该作者
看细胞融合度吧,80%左右按1:3就可以。如果100%融合,1:4也行。建议不要让细胞完全铺满瓶子,对细胞状态有一定影响,容易引起细胞老化或分化。
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发表于 2014-2-17 16:20 |只看该作者
最好还是计数,保证每次传的密度相同或近似,之前我传细胞,密度时高时低,细胞状态不稳定,影响实验结果稳定性,后来统一密度后就好很多。还有一个问题提出来,有时传代的时候,比如一瓶传三瓶,这三瓶细胞会有一瓶细胞长的很慢或是不长,遇到好几次了,不知道怎么回事,有没有遇到同样问题的?
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发表于 2014-2-18 09:58 |只看该作者
回复 nines 的帖子
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