肿瘤细胞能诱导成IPSC吗？

Sakya

请教一个问题，一般发现新突变基因或者检测肿瘤细胞的突变基因是通过把一群肿瘤细胞DNA提取出来，再进行分析，假设这样发现10个新突变基因。那么这并不代表每个肿瘤细胞都10是个突变基因，假设这群肿瘤细胞共有10^6个癌细胞，只能说明这些癌细胞一共加起来就10个突变基因。很可能大多数癌细胞没有基因突变，很多癌细胞可能只有一、两个突变基因。只有分离出单个癌细胞并进行基因突变分析才能知道具体每个癌细胞突变的基因数目。但是这样做技术上似乎行不通？

Sakya

knowtumor 发表于 2013-1-20 23:56 8 J% ~- M- a0 r
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版主欠我两个问题没有回答。

) T/ {" s. }. t求成纤维细胞编程为卵细胞的原文。很想知道是不是让二倍体的成纤维细胞变成了单倍体的卵细胞。另外，不知能否反过来重编程：卵细胞——变为——成纤维细胞或其他二倍体细胞。最后一个问题：如何保证重编程是采用的细胞纯度，就是保证把变成诱导因子导入指定的细胞而不是其他混杂的细胞中。

marrowstem

     你上面的两个帖子都提到了很好的问题，关注到了表象背后隐藏的问题，即被操作细胞是否是纯的问题，我不想就此展开讨论，因为与人争论过多次了。由于目前在技术上很难做到单细胞操作，所以是争论不出一个什么是非来的。& `. t4 A3 }. n& D7 O# a
      但可喜的一点是，单细胞测序和单细胞成像技术近几年取得了不少的进展，所以相信在不久的将来，我们完全有理由期盼——有很多的正如你提到的问题会有明确的结果出来，到那时也许可能是干细胞可以大展身手和肿瘤可以进一步明确认识的时候。

weiyepan

回复 Sakya 的帖子  C$ `! l$ T5 _. B

* X+ z+ W! g  F, k7 L关于你说的“只有分离出单个癌细胞并进行基因突变分析才能知道具体每个癌细胞突变的基因数目”实际上现在有很多文献都是分离出单克隆的细胞让其增殖以后分析的，现在的认知都是单克隆细胞群里面细胞都是一致的，技术上并没有行不通。只是这种单克隆群里面每一个细胞的基因组构成是不是一样，而且还有一个问题就是在体外环境培养究竟会对其基因组产生什么样的改变，我们都没办法证实。毕竟现在单分子测序还是有困难没突破。

Sakya

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, q* G) X1 P7 Z3 B* c单克隆细胞群里面细胞都是一致的。————对于肿瘤细胞这点不满足，肿瘤细胞基因组不稳定是其一大特征。

weiyepan

回复 Sakya 的帖子9 R1 |- z; i: Q" {2 M& n
! P, w% N" `' W7 i; B  W
不稳定是不稳定，但也是有条件的。受到刺激很容易变异也叫不稳定，不受刺激也会变异也叫不稳定。体外培养条件是稳定的，但是基因组稳不稳定有报道么？