包病毒细胞总是污染，怎么办？

ying

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他的主要矛盾是污染，而不是效率低。

yuhaoze

回复 ying 的帖子7 X4 D' |; J4 g, A% p: k1 m! b; U

4 L: ^: `: `' b3 p呵呵，从源头上解决污染的问题，不要靠加抗生素来安慰自己。就算是加了抗生素一时抑制住了细菌真菌了，包装效率上不去，不是一样实验不成功？那这主要矛盾又是什么呢？

huangcong1988

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! |# ?8 G4 Q( [3 f) J; K" W- l5 T, x6 i+ P: |. n4 f
转染的话，medium 里面能有双抗么？lip2000转染的话，培养基是不能加双抗的

huangcong1988

回复 ying 的帖子% _0 ]# c# M" `; E$ q" z
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yuhaoze说得对的，转染的时候medium里面是不能加双抗的，转染试剂里面也有说明，而且他这个包毒过程老是有细菌污染，我觉得很有可能是操作的原因，包毒过程一般很少能有污染的

yylhxylong

回复 huangcong1988 的帖子- i4 H# K$ d5 T; B

/ F. ?/ _6 S+ q! |你说的medium 说的是转染的六个小时里，还是转染后的换液~~
# w' q9 ?/ [6 a* H/ xlipo2000转染的六个小时里面我们也不用双抗~

牙牙丫丫123

回复 yueweilei 的帖子7 ^/ [, r0 `+ o% e  V

: r  k- g+ s  p( G8 r第一：你包装病毒时转染那一步用的基础培养液和其他细胞是不是一样，比如说包装病毒用Opti-MEM，其他细胞用MEM；第二，你用的脂质体是否是一致的。如果上面两个都是一样的，一般是质粒污染了。而且包装病毒过程中最好不要加任何抗生素，会影响病毒滴度的。

monk125

检验是不是质粒污染很简单 搞点质粒在神马都没有的新培液过夜后你再去看看 假如不是质粒的问题 我觉得你应该check下病毒吧 实在不行加点双抗 很多实验培液里不加双抗细胞都养不活 哎 这真是伤不起啊

huangcong1988

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  g& k. l( O; B/ ]转染的整个过程都不能加！转染的那六个小时，转染后直至收毒都不能加